公开(公告)号：CN101967523B

公开(公告)日：2013-08-14

申请号：CN201010218049.6

申请日：2010-06-27

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 成子强 ,  刘功振 ,  张利 ,  王晓伟

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种用于检测J亚群禽白血病病毒的斑点杂交方法。所述的核酸探针是基于J亚群禽白血病病毒囊膜env特异性基因序列，长度为248bp，位置在hprs-103原型毒株的第6736bp-6983bp之间，通过合成该目的基因，大量克隆；标记制备ALV-J的核酸探针；提取接毒细胞DNA，用斑点杂交的方法进行检测，在尼龙膜固定DNA，预杂交和杂交，洗膜，显色检测斑点杂交反应阳性。通过摸索ALV-J核酸探针与DNA反应最佳反应温度为50℃，探针反应浓度25ng/ml，确定用于检测ALV-J的斑点杂交方法，斑点杂交的结果表明该核酸探针能有效地检测出ALV-J，对禽白血病各亚群、马立克氏病、网状内皮增生症有效地进行鉴别诊断，并且该核酸探针的检测快捷准确，因此本发明为J亚群禽白血病的诊断提供了新的思路和方法。

公开(公告)号：CN101967523A

公开(公告)日：2011-02-09

申请号：CN201010218049.6

申请日：2010-06-27

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 成子强 ,  刘功振 ,  张利 ,  王晓伟

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种用于检测J亚群禽白血病病毒的斑点杂交方法。所述的核酸探针是基于J亚群禽白血病病毒囊膜env特异性基因序列，长度为248bp，位置在hprs-103原型毒株的第6736bp-6983bp之间，通过合成该目的基因，大量克隆；标记制备ALV-J的核酸探针；提取接毒细胞DNA，用斑点杂交的方法进行检测，在尼龙膜固定DNA，预杂交和杂交，洗膜，显色检测斑点杂交反应阳性。通过摸索ALV-J核酸探针与DNA反应最佳反应温度为50℃，探针反应浓度25ng/ml，确定用于检测ALV-J的斑点杂交方法，斑点杂交的结果表明该核酸探针能有效地检测出ALV-J，对禽白血病各亚群、马立克氏病、网状内皮增生症有效地进行鉴别诊断，并且该核酸探针的检测快捷准确，因此本发明为J亚群禽白血病的诊断提供了新的思路和方法。