公开(公告)号：CN116121174A

公开(公告)日：2023-05-16

申请号：CN202211207499.4

申请日：2022-09-30

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 王恒 ,  马彤彤 ,  郑馨仪 ,  朱桂玉 ,  任瑞敏 ,  华耀 ,  叶婷婷 ,  杨刘斌

IPC: C12N5/073 ,  C12N13/00

Abstract: 本发明公开了一种鸡胚胎成纤维细胞体外三维培养和分离的方法，属于细胞培养技术领域。本发明的培养方法包括以下步骤：(1)将鸡胚胎成纤维细胞复苏后至少传代培养一代，获得细胞悬液，离心，丢弃上清液，加入GelMA水凝胶溶液，重悬细胞，得到混合液；(2)将混合液用紫外光源照射，获得鸡胚胎成纤维细胞‑GelMA水凝胶复合物；(3)将鸡胚胎成纤维细胞‑GelMA水凝胶复合物转移至培养皿中，加入培养液，细胞培养7‑9d；(4)细胞培养结束后，弃去培养液，加入胶原蛋白II酶消化处理5‑10min，离心，收集细胞沉淀。本发明建立的鸡胚胎成纤维细胞三维培养体系更好的模拟了细胞体内生存环境，可以实现鸡胚胎成纤维细胞在体外立体培养介质中的快速增殖，更具有研究价值。