公开(公告)号：CN118326082A

公开(公告)日：2024-07-12

申请号：CN202410554309.9

申请日：2024-05-07

Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所 ,  安徽农业大学

Inventor： 戴银 ,  刘雪兰 ,  仲月怡 ,  程帮照 ,  胡晓苗 ,  殷冬冬 ,  王洁茹 ,  尹磊 ,  沈学怀 ,  潘孝成 ,  赵瑞宏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了检测鸭肠炎病毒的MIRA、MIRA‑qPCR和MIRA‑LFD引物组及检测方法，包括以下一对或多对引物：MIRA引物对：上游引物MIRA‑F1序列为ACTGTTGTCGGAGGATACCCTT GCAGCCACT；下游引物MIRA‑R1序列为GCCGATCAATTATGAGCGTAATATCTGGT；本发明涉及微生物检测技术领域。该检测鸭肠炎病毒的MIRA、MIRA‑qPCR和MIRA‑LFD引物组及检测方法，相对传统的检测方法更简便易行、耗时短，结果呈现方式多样，更适用于基层对疫病病原的及时检测与防控；与传统的PCR和实时荧光定量PCR(q‑PCR)检测方法相比，本技术方案建立的MIRA检测方法更为快速简便；与常见的病原检测方法相比，MIRA的三种检测方法更为快速、简易具有良好的灵敏性和特异性，这为DEV的现场快捷、可视化检测了提供了新途径。

公开(公告)号：CN117757988A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202311805795.9

申请日：2023-12-26

Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 戴银 ,  周慧琴 ,  谷思琴 ,  仲月怡 ,  王洁茹 ,  殷冬冬 ,  尹磊 ,  沈学怀 ,  潘孝成 ,  胡晓苗 ,  赵瑞宏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种基于LAMP及HNB指示剂的水禽细小病毒检测方法，包括以下步骤：步骤一：病毒株、实验仪器和实验试剂准备；步骤二：引物设计与合成；步骤三：提取病毒核酸；步骤四：LAMP检测反应的建立和条件优化；步骤五：试验LAMP检测技术的特异性；步骤六：试验LAMP检测反应的敏感性；步骤七：LAMP检测技术的临床样品应用，本发明涉及生物检测技术领域，本发明以GPV和MDPV的NS基因为检测靶基因，设计了一组特异性LAMP引物，建立了恒温快速诊断方法，并做了初步临床应用试验。同时，将该检测技术与羟基萘酚蓝(HNB)变色染料相结合，成功建立了LAMP‑HNB可视化诊断方法，能够为基层部门以及现场检测水禽细小病毒提供一种快速、便捷的技术手段。

公开(公告)号：CN118291674A

公开(公告)日：2024-07-05

申请号：CN202410406657.1

申请日：2024-04-07

Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 戴银 ,  仲月怡 ,  王洁茹 ,  殷冬冬 ,  尹磊 ,  沈学怀 ,  潘孝成 ,  胡晓苗

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了基于MIRA技术三种检测H9N2亚型禽流感病毒的引物组，包括引物对和探针；所述探针包括荧光探针和胶体金探针；所述荧光探针序列有四个修饰位点：5′端中间的dSpacer作为核酸外切酶识别位点、上游的荧光基团、下游的淬灭基团和3'端的C3间隔区；所述胶体金探针序列有三个修饰位点：5′端修饰一个抗原标记、在5′端和3′末端的中部位置标记一个dSpacer作为nfo的识别位点、3′末端标记一个修饰基团。通过上述方式，本发明建立的基础型、实时荧光型和胶体金型MIRA检测方法的最低检出浓度均为1x102copies/μl，该方法特性好且不需要热循环仪，胶体金MIRA仅需15min就可完成检测，结果可视较为方便。

公开(公告)号：CN118166161A

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202410406731.X

申请日：2024-04-07

Applicant: 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 戴银 ,  仲月怡 ,  殷冬冬 ,  王洁茹 ,  尹磊 ,  沈学怀 ,  潘孝成 ,  赵瑞宏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了基于MIRA技术三种检测禽腺病毒4型的引物组，包括引物对和探针；所述探针包括荧光探针和胶体金探针；所述荧光探针序列有四个修饰位点：5′端中间的dSpacer作为核酸外切酶识别位点、上游的荧光基团、下游的淬灭基团和3'端的C3间隔区；所述胶体金探针序列有三个修饰位点：5′端修饰一个抗原标记、在5′端和3′末端的中部位置标记一个dSpacer作为nfo的识别位点和3′末端标记一个修饰基团。通过上述方式，本发明建立的MIRA检测方法特异性良好，基础型MIRA检测方法的最低检出浓度为1x103copies/μl，荧光型MIRA和胶体金型MIRA最低检出浓度为1x102copies/μl，灵敏度高且操作时间短，其中胶体金MIRA仅需20min就可完成检测且肉眼可直接观察结果。