公开(公告)号：CN104726435A

公开(公告)日：2015-06-24

申请号：CN201510172770.9

申请日：2015-04-13

Applicant: 安徽大学

Inventor： 房伟 ,  肖亚中 ,  杨旸 ,  方泽民 ,  张学成 ,  何超

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12Y302/01021

Abstract: 本发明通过基因定点突变的方法获乙醇耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌，并可在将工程菌诱导表达后，获得乙醇耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础，通过PCR定点突变，获得突变基因。在35℃条件下，相对野生型β-葡萄糖苷酶蛋白，获得的突变蛋白的乙醇耐受浓度IC50提高了1.8倍，且葡萄糖耐受浓度提高2倍，pH及温度稳定性提高，底物亲和力及催化效率得以提升。该突变体能够在较短时间内高效水解大豆异黄酮糖苷制备苷元，具有潜在应用价值。

公开(公告)号：CN104726435B

公开(公告)日：2018-05-29

申请号：CN201510172770.9

申请日：2015-04-13

Applicant: 安徽大学

Inventor： 房伟 ,  肖亚中 ,  杨旸 ,  方泽民 ,  张学成 ,  何超

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明通过基因定点突变的方法获乙醇耐受浓度提高的β‑葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌，并可在将工程菌诱导表达后，获得乙醇耐受浓度提高的β‑葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β‑葡萄糖苷酶为基础，通过PCR定点突变，获得突变基因。在35℃条件下，相对野生型β‑葡萄糖苷酶蛋白，获得的突变蛋白的乙醇耐受浓度IC50提高了1.8倍，且葡萄糖耐受浓度提高2倍，pH及温度稳定性提高，底物亲和力及催化效率得以提升。该突变体能够在较短时间内高效水解大豆异黄酮糖苷制备苷元，具有潜在应用价值。