公开(公告)号：CN104561236B

公开(公告)日：2016-10-05

申请号：CN201510014685.X

申请日：2015-01-12

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 邓威威 ,  宛晓春 ,  顾辰辰 ,  范妍冰 ,  袁艳

IPC: C12Q1/25 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明涉及一种快速检测茶氨酸合成酶活性的检测方法，包括：培养液的制备、检测材料的准备、超高效液相色谱‑串联质谱检测、酶活性的分析四个步骤。在培养液中加入15N标记的茶氨酸合成底物(15N标记的盐酸乙胺)，通过超高效液相色谱‑串联质谱检测反应产物中合成的茶氨酸含量，运用其中14N‑茶氨酸与15N‑茶氨酸的比例，来区分培养过程中合成的茶氨酸，以分析茶氨酸合成酶活性。本发明针对性强，方法简单，准确性强，灵敏度高，能够准确检测到茶氨酸合成酶反应产物；操作方便，检测方法精确，避免了以前茶氨酸合成酶检测过程中，其提取的粗酶液中含有的高含量茶氨酸本底，在酶活性较低，产物较少的情况下无法检测到酶活性。

公开(公告)号：CN104561236A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201510014685.X

申请日：2015-01-12

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 邓威威 ,  宛晓春 ,  顾辰辰 ,  范妍冰 ,  袁艳

IPC: C12Q1/25 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明涉及一种快速检测茶氨酸合成酶活性的检测方法，包括：培养液的制备、检测材料的准备、超高效液相色谱-串联质谱检测、酶活性的分析四个步骤。在培养液中加入15N标记的茶氨酸合成底物(15N标记的盐酸乙胺)，通过超高效液相色谱-串联质谱检测反应产物中合成的茶氨酸含量，运用其中14N-茶氨酸与15N-茶氨酸的比例，来区分培养过程中合成的茶氨酸，以分析茶氨酸合成酶活性。本发明针对性强，方法简单，准确性强，灵敏度高，能够准确检测到茶氨酸合成酶反应产物；操作方便，检测方法精确，避免了以前茶氨酸合成酶检测过程中，其提取的粗酶液中含有的高含量茶氨酸本底，在酶活性较低，产物较少的情况下无法检测到酶活性。