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公开(公告)号:CN113684288A
公开(公告)日:2021-11-23
申请号:CN202111036574.0
申请日:2021-09-03
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/6837 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于疾病检测技术领域,是涉及用于检测猪胸膜肺炎放线杆菌的LAMP引物组及试剂盒和LAMP微流控芯片。本发明提供了用于检测猪胸膜肺炎放线杆菌的LAMP引物组,所述LAMP引物组包括外引物和内引物。本发明选取具有较高特异性的APX Ⅳ基因序列做为本申请检测的靶基因,设计出一组用于微流控芯片技术的具有高特异性、高灵敏度的引物组。该LAMP引物组特异性较好,不会与猪的其他病原菌发生交叉反应,最低检测限度为1.17pg/μL。将LAMP引物组利用微流控芯片技术应用于临床样本检测中,能够实现对于猪胸膜肺炎放线杆菌的即时检测,能够解决猪胸膜肺炎放线杆菌以往的耗时、费力的缺陷,缩短检测周期。
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公开(公告)号:CN105131087A
公开(公告)日:2015-12-09
申请号:CN201510438045.1
申请日:2015-07-22
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及具有黏附拮抗活性的拟态弧菌OmpU黏附素蛋白结合肽、多肽组合物及其应用。本拟态弧菌OmpU黏附素蛋白结合肽由氨基酸序列SEQ ID NO:1组成。而多肽组合物则由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2以及SEQ ID NO:3三种多肽组成,且SEQ ID NO:1所示多肽、SEQ ID NO:2所示多肽、SEQ ID NO:3所示多肽三者的质量配比为1:1:1。本发明中的具有黏附拮抗活性的OmpU黏附素蛋白结合肽及其多肽组合物不但可与OmpU黏附素蛋白发生特异性结合,而且能够有效地抑制拟态弧菌通过该黏附素黏附定植于肠黏膜表面,进而达到消减拟态弧菌毒力的作用。由具有黏附拮抗活性的OmpU黏附素蛋白结合肽及其多肽组合物制成的黏附拮抗剂,能够有效地防治拟态弧菌引起的鱼类腹水病。
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公开(公告)号:CN105131087B
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201510438045.1
申请日:2015-07-22
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及具有黏附拮抗活性的拟态弧菌OmpU黏附素蛋白结合肽、多肽组合物及其应用。本拟态弧菌OmpU黏附素蛋白结合肽由氨基酸序列SEQ ID NO:1组成。而多肽组合物则由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2以及SEQ ID NO:3三种多肽组成,且SEQ ID NO:1所示多肽、SEQ ID NO:2所示多肽、SEQ ID NO:3所示多肽三者的质量配比为1:1:1。本发明中的具有黏附拮抗活性的OmpU黏附素蛋白结合肽及其多肽组合物不但可与OmpU黏附素蛋白发生特异性结合,而且能够有效地抑制拟态弧菌通过该黏附素黏附定植于肠黏膜表面,进而达到消减拟态弧菌毒力的作用。由具有黏附拮抗活性的OmpU黏附素蛋白结合肽及其多肽组合物制成的黏附拮抗剂,能够有效地防治拟态弧菌引起的鱼类腹水病。
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公开(公告)号:CN103412122B
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201310347757.3
申请日:2013-08-09
Applicant: 安徽农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
Abstract: 本发明属于免疫分析技术领域,具体涉及一种同步检测金葡菌A型和G型肠毒素的基于多表位串联肽的间接竞争ELISA方法。本发明的方法主要包括A型和G型肠毒素多表位串联肽SE A/G(包被抗原)的制备、兔抗SE A/G抗体的制备、样品前处理和基于多表位串联肽的间接竞争ELISA检测方法的建立。该间接竞争ELISA检测方法由以下步骤组成:1)包被;2)洗板;3)封闭;4)洗板;5)依次加入标准品、待测样品和特异性抗体;6)洗板;7)加入酶标二抗;8)洗板;9)显色和终止反应。本发明方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好的特点,适合于乳与乳制品等食品中金葡菌A型和G型肠毒素的快速和同步定量检测。
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公开(公告)号:CN1824327A
公开(公告)日:2006-08-30
申请号:CN200510134964.6
申请日:2005-12-27
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 一种用鸡MHC恒定链基因片段引导的核酸疫苗制备方法属疫苗制备技术领域。其所要解决的技术问题是:通过制备含编码鸡MHC恒定链和特定病原体保护性抗原表位核苷酸序列的核酸疫苗,提供一种既安全、又高效的新型疫苗型。其技术要点是:先制备鸡MHC定链基因片段,再制备特定病原体保护性抗原或抗原表位基因片段;再制备含鸡MHC恒定链与特定病原体保护性抗原或抗原表位的融合基因片段;最后将鸡MHC恒定链与特定病原体保护性抗原融合基因片段定向插入真核表达载体,即得到本发明的核酸疫苗。与现有的疫苗相比较,本发明的核酸疫苗由于不存在病原返祖和变异的可能,所以安全可靠;且可提高免疫应答效果。
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公开(公告)号:CN103933560A
公开(公告)日:2014-07-23
申请号:CN201310665615.1
申请日:2013-12-09
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种应用Ii-Key活性四肽携带法氏囊VP2和新城疫HN抗原肽表位嵌合疫苗的制备方法,通过人工合成Ii-Key与鸡传染性法氏囊病毒VP2肽表位(197-209)和新城疫病毒HN肽表位(345-353)的嵌合体基因,分别插入pET-32a原核表达载体后转化大肠杆菌Rosetta,经镍亲和柱层析纯化后,将重组蛋白免疫SPF级BALb/c小鼠,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠体内的抗体水平;与单纯VP2197-209/HN345-353串联表位对照组相比较,本发明构建的基于活性Ii-Key四肽的嵌合体疫苗组抗体效价平均提高了13.72倍。该疫苗具有特异性强、易于制备、免疫效果好的特点。
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公开(公告)号:CN103412122A
公开(公告)日:2013-11-27
申请号:CN201310347757.3
申请日:2013-08-09
Applicant: 安徽农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
Abstract: 本发明属于免疫分析技术领域,具体涉及一种同步检测金葡菌A型和G型肠毒素的基于多表位串联肽的间接竞争ELISA方法。本发明的方法主要包括A型和G型肠毒素多表位串联肽SE A/G(包被抗原)的制备、兔抗SE A/G抗体的制备、样品前处理和基于多表位串联肽的间接竞争ELISA检测方法的建立。该间接竞争ELISA检测方法由以下步骤组成:1)包被;2)洗板;3)封闭;4)洗板;5)依次加入标准品、待测样品和特异性抗体;6)洗板;7)加入酶标二抗;8)洗板;9)显色和终止反应。本发明方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好的特点,适合于乳与乳制品等食品中金葡菌A型和G型肠毒素的快速和同步定量检测。
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公开(公告)号:CN101747416B
公开(公告)日:2012-11-14
申请号:CN201010046506.8
申请日:2010-01-05
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明属于分子免疫学领域,具体涉及一种能诱导鱼体产生抗拟态弧菌感染的保护性免疫反应的OmpU抗原B细胞多表位串联肽及其构建方法与用途。本发明中OmpU抗原B细胞多表位串联肽的氨基酸序列如SEQIDNO:10所示。本发明提供的是通过基因工程技术生产的拟态弧菌OmpU蛋白B细胞多表位串联肽,经免疫印迹分析、特异性抗体检测和免疫动物保护性实验验证,表明其能激发高效而特异的抗拟态弧菌感染的保护性体液免疫应答,由于本发明获得的此B细胞多表位串联肽可用于水产动物腹水病的免疫诊断和免疫防治,因此其具有较高的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号:CN101747416A
公开(公告)日:2010-06-23
申请号:CN201010046506.8
申请日:2010-01-05
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明属于分子免疫学领域,具体涉及一种能诱导鱼体产生抗拟态弧菌感染的保护性免疫反应的OmpU抗原B细胞多表位串联肽及其构建方法与用途。本发明中OmpU抗原B细胞多表位串联肽的氨基酸序列如SEQIDNO:10所示。本发明提供的是通过基因工程技术生产的拟态弧菌OmpU蛋白B细胞多表位串联肽,经免疫印迹分析、特异性抗体检测和免疫动物保护性实验验证,表明其能激发高效而特异的抗拟态弧菌感染的保护性体液免疫应答,由于本发明获得的此B细胞多表位串联肽可用于水产动物腹水病的免疫诊断和免疫防治,因此其具有较高的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号:CN1072727C
公开(公告)日:2001-10-10
申请号:CN98106744.1
申请日:1998-03-25
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明提供了一种同步检测鸡新城疫ND、传染性德氏囊IBD、传染性支气管炎IB和(产蛋单下降综合症)EDS四种病毒的条形酶标斑点试剂盒的制备方法,其方法是取鸡NDV、IBDV、IBV和EDS四种抗体,用pH9.6碳酸盐缓冲液稀释制成包被液;用此包被液对硝酸纤维膜进行包被,包被好的硝酸纤维膜与其他相应试剂配合使用。该试剂盒通过一次取样即可同时检测上述四种病毒,并具有操作方法简便,快速、灵敏、可靠及经济等显著的优点,是一项值得推广的技术。
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