公开(公告)号：CN105594342A

公开(公告)日：2016-05-25

申请号：CN201610052717.X

申请日：2016-01-25

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 汪承刚 ,  张盛云 ,  陈国户 ,  袁凌云 ,  朱世东 ,  刘思嘉 ,  方柔

IPC: A01C1/08 ,  A01H4/00

CPC classification number: A01C1/08 ,  A01H4/008

Abstract: 本发明提供一种用于乌菜无菌苗培养的种子消毒方法，所述方法是将乌菜种子用清水冲洗20-30min后，置于75％酒精中浸泡消毒30-120s，然后用无菌水冲洗2-4遍，再用1-8％次氯酸钠溶液浸泡消毒5-12min，最后用无菌水冲洗2-4遍，即完成种子消毒。本发明基于乌菜无菌苗种子常规消毒方法进行三因素四水平的正交试验设计，结果表明，75％酒精浸泡30s后，用2％次氯酸钠溶液消毒5min，既可以降低乌菜种子的带菌率，提高消毒效果，又可以保证种子的发芽率，有利于后续乌菜无菌苗培养技术的深入研究。

公开(公告)号：CN105543215A

公开(公告)日：2016-05-04

申请号：CN201610087704.6

申请日：2016-02-16

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 汪承刚 ,  方柔 ,  刘思嘉 ,  陈国户 ,  袁凌云 ,  朱世东 ,  葛继涛

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/1003 ,  C12Q2523/32

Abstract: 本发明涉及乌塌菜总RNA的高效提取方法，通过向乌塌菜叶片中加入液氮研磨、提高离心转速、使用不同浓度乙醇洗涤RNA沉淀等操作，可实现高纯度高浓度、且无降解的乌塌菜总RNA的提取。本发明首次提供一套科学系统地从乌塌菜叶片中提取总RNA的方法，不仅提高了提取效率，又可有效避免提取过程中的污染，导致RNA降解，采用本方法仅需50-55min即可完成乌塌菜总RNA的提取，获得的高纯度高浓度无降解的总RNA，有利于后续研究的深入。

公开(公告)号：CN105505919A

公开(公告)日：2016-04-20

申请号：CN201610052253.2

申请日：2016-01-25

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 汪承刚 ,  葛继涛 ,  陈国户 ,  袁凌云 ,  朱世东 ,  刘姗 ,  方柔 ,  刘思嘉 ,  张盛云

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/1003

Abstract: 本发明涉及一种高效提取酥瓜基因组DNA的方法。该方法包括如下步骤：取材料，用液氮研磨成粉末，直接向研钵内加入2％CTAB提取液，解冻后转移至离心管，摇匀后水浴，冷却；加入氯仿和异戊醇，摇匀后离心；取上清液加入到已预冷的装有乙醇的离心管中，先放入-80℃环境中静置，再放入-20℃环境中静置；倒出乙醇，先用75％乙醇冲洗，再用无水乙醇冲洗，离心后吸出残余乙醇，自然干燥后溶解DNA；加入核糖核酸酶，将RNA充分消化，加入氯仿/异戊醇，混匀后离心；取上清液，加入到含有无水乙醇和醋酸钠的离心管中，-80℃静置沉淀；倒出乙醇，先用75％乙醇冲洗，再用无水乙醇冲洗，干燥后溶解DNA，低温保存。