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公开(公告)号：CN108085310B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201711347198.0
申请日：2017-12-15
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种小菜蛾识别蛋白PxIDGF制品及其制备方法和应用，所述蛋白制品的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。从小菜蛾四龄幼虫体中提取总RNA，逆转录合成第一链cDNA，利用设计引物从cDNA中扩增小菜蛾识别蛋白PxIDGF基因，将小菜蛾识别蛋白PxIDGF基因克隆到pCzn1载体中，然后将重组质粒转入到大肠杆菌Arctic‑Express表达菌株，诱导融合蛋白表达，通过变复性的方式，重溶目标蛋白，通过Ni柱亲和纯化获得目的蛋白。本发明制备的小菜蛾识别蛋白PxIDGF制品纯度高、活性高，具有结合和凝集大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的能力。本发明可为深入研究小菜蛾识别蛋白PxIDGF的应用打下技术基础。
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公开(公告)号：CN113461777B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202110944196.X
申请日：2021-08-17
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有抗真菌作用的抗菌肽及其制备方法和应用，涉及生物技术领域，所述抗菌肽利用固相合成的方法从多肽C端到N端人工合成。所述抗菌肽氨基酸序列为Ac‑WKKWFR‑NH2，其对白色念珠菌具有抗菌活性，对白色念珠菌最小抑菌浓度为50μg/mL。其可破坏白色念珠菌细胞壁完整性，短时间内造成细胞膜渗透率增加。抗菌肽处理的白色念珠菌细胞结构异常且不规则，造成细胞胞浆原生质紊乱，细胞内部出现多个空泡。所述抗菌肽可与白色念珠菌基因组DNA结合，诱导胞内ROS的增加。制备的抗菌肽可作为抗菌剂广泛应用于医药原料、食品、果蔬防腐保鲜、植物真菌病害防治以及饲料添加剂等领域。
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公开(公告)号：CN108085310A
公开(公告)日：2018-05-29
申请号：CN201711347198.0
申请日：2017-12-15
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种小菜蛾识别蛋白PxIDGF制品及其制备方法和应用，所述蛋白制品的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。从小菜蛾四龄幼虫体中提取总RNA，逆转录合成第一链cDNA，利用设计引物从cDNA中扩增小菜蛾识别蛋白PxIDGF基因，将小菜蛾识别蛋白PxIDGF基因克隆到pCzn1载体中，然后将重组质粒转入到大肠杆菌Arctic-Express表达菌株，诱导融合蛋白表达，通过变复性的方式，重溶目标蛋白，通过Ni柱亲和纯化获得目的蛋白。本发明制备的小菜蛾识别蛋白PxIDGF制品纯度高、活性高，具有结合和凝集大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的能力。本发明可为深入研究小菜蛾识别蛋白PxIDGF的应用打下技术基础。
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公开(公告)号：CN115974972B
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310123493.7
申请日：2023-02-07
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明提供一种防治猕猴桃溃疡病菌的抗菌肽、制备方法及其应用，属于生物技术领域。本发明所述抗菌肽的氨基酸序列为Trp‑Trp‑Lys‑Leu‑Leu‑Arg‑Lys‑Leu‑NH2，具有典型的两亲性结构。该抗菌肽可靶向猕猴桃溃疡病菌细胞膜，增加其膜的通透性和耗散膜电位，导致钙离子渗漏。该抗菌肽还作用于细胞内靶标，影响DNA功能，降低酯酶的活性和诱导活性氧的生成。该抗菌肽对猕猴桃溃疡病菌的最小抑菌浓度为3.13μg/mL，半最大有效浓度为1.67μg/mL，其活性明显高于农用链霉素。本发明制备的抗菌肽在体内、体外均可有效控制猕猴桃溃疡病菌，可作为杀菌剂应用于猕猴桃溃疡病的防治。
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公开(公告)号：CN113461777A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110944196.X
申请日：2021-08-17
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有抗真菌作用的抗菌肽及其制备方法和应用，涉及生物技术领域，所述抗菌肽利用固相合成的方法从多肽C端到N端人工合成。所述抗菌肽氨基酸序列为Ac‑WKKWFR‑NH2，其对白色念珠菌具有抗菌活性，对白色念珠菌最小抑菌浓度为50μg/mL。其可破坏白色念珠菌细胞壁完整性，短时间内造成细胞膜渗透率增加。抗菌肽处理的白色念珠菌细胞结构异常且不规则，造成细胞胞浆原生质紊乱，细胞内部出现多个空泡。所述抗菌肽可与白色念珠菌基因组DNA结合，诱导胞内ROS的增加。制备的抗菌肽可作为抗菌剂广泛应用于医药原料、食品、果蔬防腐保鲜、植物真菌病害防治以及饲料添加剂等领域。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115974972A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202310123493.7
申请日：2023-02-07
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明提供一种防治猕猴桃溃疡病菌的抗菌肽、制备方法及其应用，属于生物技术领域。本发明所述抗菌肽的氨基酸序列为Trp‑Trp‑Lys‑Leu‑Leu‑Arg‑Lys‑Leu‑NH2，具有典型的两亲性结构。该抗菌肽可靶向猕猴桃溃疡病菌细胞膜，增加其膜的通透性和耗散膜电位，导致钙离子渗漏。该抗菌肽还作用于细胞内靶标，影响DNA功能，降低酯酶的活性和诱导活性氧的生成。该抗菌肽对猕猴桃溃疡病菌的最小抑菌浓度为3.13μg/mL，半最大有效浓度为1.67μg/mL，其活性明显高于农用链霉素。本发明制备的抗菌肽在体内、体外均可有效控制猕猴桃溃疡病菌，可作为杀菌剂应用于猕猴桃溃疡病的防治。
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公开(公告)号：CN113621620A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110942853.7
申请日：2021-08-17
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/89
Abstract: 本发明公开了一种具有调控小菜蛾免疫功能的基因及其制备方法和应用，涉及生物技术领域。本发明的基因Lnc40766或基因Toll‑like 6通过小菜蛾总RNA提取、cDNA合成和设计特异引物扩增获得。同时提供了干扰基因Lnc40766表达的dsRNA的制备和干扰基因Toll‑like6表达的dsRNA的制备。将Lnc40766基因的dsRNA微量注射到小菜蛾3龄幼虫体内后，Lnc40766基因和靶基因Toll‑like 6的表达水平显著降低。经蝉拟青霉侵染后，幼虫死亡率显著提高。表明基因Lnc40766基因和基因Toll‑like 6均具有调控小菜蛾免疫功能的作用，可作为小菜蛾害虫防治的可能靶标。本发明也可为新的害虫生物防治方法提供理论基础。
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公开(公告)号：CN119061019A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411409519.5
申请日：2024-10-10
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/10 , A01N57/16 , A01P7/04
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及调控小菜蛾抵御蝉拟青霉侵染的基因、制备方法及其应用，基因为miR308‑p3或PGRP‑LB，通过PCR扩增获得。同时提供了过表达或抑制miR308‑p3的制备方法以及干扰基因PGRP‑LB表达的dsRNA的制备方法。小菜蛾3龄幼虫注射PGRP‑LB基因的dsRNA后，PGRP‑LB基因的转录水平大幅减少。经蝉拟青霉侵染后小菜蛾存活率显著降低。将miR308‑p3的模拟物或抑制剂分别注射到小菜蛾的3龄幼虫后，PGRP‑LB的表达水平分别显著降低或升高，miR308‑p3能够负调控PGRP‑LB的表达。过表达miR308‑p3和抑制miR308‑p3的表达后的小菜蛾在蝉拟青霉侵染后存活率分别显著降低和升高。表明基因miR308‑p3通过负调控PGRP‑LB的表达进而参与到小菜蛾对蝉拟青霉侵染的免疫反应，这两个基因可应用到害虫防治中，能有效提高真菌杀虫剂防治效果。
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公开(公告)号：CN118480087A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410562301.7
申请日：2024-05-08
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种防治猕猴桃细菌性溃疡病的抗菌肽、制备方法及其应用，抗菌肽氨基酸序列为Trp‑Lys‑Lys‑Leu‑Phe‑Lys‑Lys‑Ile‑NH2，该抗菌肽对猕猴桃细菌性溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)的最小抑菌浓度为12.5μg/mL，半最大抑制浓度为3.13μg/mL。抗菌肽处理后Psa细胞膜和内膜通透性增加，导致细胞内钙离子外流。该抗菌肽以剂量依赖的方式促进Psa细胞内的活性氧累积。抗菌肽还可以结合Psa的基因组DNA，并能显著影响Psa的DNA复制基因与修复基因的表达。抗菌肽处理显著降低猕猴桃叶盘病发病率和叶盘内Psa菌落数量，抗菌肽在离体叶盘内具有杀菌作用。本发明抗菌肽对Psa具有较好的抗菌活性和明确的作用机制，可开发为新型抗菌肽杀菌剂，为猕猴桃细菌性溃疡病等病害的治理提供可能的产品。
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公开(公告)号：CN113621620B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202110942853.7
申请日：2021-08-17
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/89
Abstract: 本发明公开了一种具有调控小菜蛾免疫功能的基因及其制备方法和应用，涉及生物技术领域。本发明的基因Lnc40766或基因Toll‑like receptor 6通过小菜蛾总RNA提取、cDNA合成和设计特异引物扩增获得。同时提供了干扰基因Lnc40766表达的dsRNA的制备和干扰基因Toll‑like receptor 6表达的dsRNA的制备。将Lnc40766基因的dsRNA微量注射到小菜蛾3龄幼虫体内后，Lnc40766基因和靶基因Toll‑like receptor 6的表达水平显著降低。经蝉拟青霉侵染后，幼虫死亡率显著提高。表明基因Lnc40766基因和基因Toll‑like receptor 6均具有调控小菜蛾免疫功能的作用，可作为小菜蛾害虫防治的可能靶标。本发明也可为新的害虫生物防治方法提供理论基础。
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