一种长效稳定表达的杆状病毒载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN110747232A

    公开(公告)日:2020-02-04

    申请号:CN201911183740.2

    申请日:2019-11-27

    Abstract: 本发明涉及一种重组杆状病毒载体及其构建方法,所述重组杆状病毒载体包含SB转座子和编码衰减加速因子(DAF)的基因,所述构建方法包含将SB转座子和编码衰减加速因子(DAF)的基因克隆至杆状病毒载体的步骤。本发明构建的重组杆状病毒表达系统,能够实现外源蛋白的长效、稳定表达。利用本发明构建的重组杆状病毒表达系统在小鼠体内表达hEA(内皮抑素和血管抑素的融合蛋白),显著提高了荷瘤小鼠的寿命和存活率。本发明的重组杆状病毒表达系统还能有效抵抗血清补体系统的攻击,还能同时借助SB转座系统表达EGFP等荧光蛋白,便于在哺乳动物细胞中持续观察荧光的表现。

    一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法

    公开(公告)号:CN106943203A

    公开(公告)日:2017-07-14

    申请号:CN201710164464.X

    申请日:2017-03-17

    CPC classification number: A61D7/00 B24B19/16

    Abstract: 本发明涉及一种注射针的制备方法,尤其是涉及一种用于睾丸输出管注射的注射针制备方法,为将外径为1mm的薄玻璃管,首先用Sutter P‑1000拉针仪拉制成内径为1‑3um的注射针,再用MF‑900煅针仪将针尖在5um处切断,用EG‑400磨针仪磨制针尖角度为30度,最后用MF‑900煅针仪将斜面拉尖即可;该方法简单、独特,而且用本方法制成的注射针非常容易插入睾丸输出管,样品渗漏少,提高注射效率,还能减少输出管的损伤,提高制备转基因动物的成功率、减少或避免动物死亡。

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