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公开(公告)号：CN110951723B
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN201911244563.4
申请日：2019-12-06
Applicant: 天津大学
Abstract: 本发明公开了一种纯DNA双链缠结水凝胶及制备方法及应用，制备方法为：向EP管中加入带有可形成i‑motif结构的粘性末端的双链线性DNA前、后引物，目标DNA，和1╳DNA聚合酶，用去离子水补齐50μl，置于PCR仪中，进行PCR扩增，得到两端带有可形成i‑motif结构的粘性末端的长双链DNA。将制备的两端带有可形成i‑motif结构的粘性末端的长双链DNA浓缩至1μg/μl，并置于pH4.5‑6.5的缓冲液中，形成纯DNA双链缠结水凝胶。本发明制备的纯DNA双链缠结水凝胶可应用于生物纳米机器领域；通过引入基因序列，该水凝胶可应用于无细胞蛋白质生产。
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公开(公告)号：CN107541510A
公开(公告)日：2018-01-05
申请号：CN201710909149.5
申请日：2017-09-29
Applicant: 天津大学
Abstract: 本发明公开了枝状基因簇纳米材料及制备方法及应用，枝状基因簇纳米材料的制备方法为：向EP管中加入多枝状DNA支架，线性引物，含有目标蛋白基因的DNA序列和聚合酶，最后使用去离子水补齐50μl体系，置于PCR仪中，进行PCR扩增，得到枝状基因簇纳米材料。枝状基因簇纳米材料在无细胞蛋白质生产的应用。构建枝状基因簇纳米材料应用于无细胞蛋白质生产，蛋白质生产效率和产量提高，不仅可以合成DNA水凝胶，作为一种生物相容性极好的材料，还可以作为基础研究的模型，用于研究生物体内表达基因邻近性的相关机理和作用。
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公开(公告)号：CN109880866B
公开(公告)日：2023-02-21
申请号：CN201910134367.5
申请日：2019-02-22
Applicant: 天津大学
IPC: C12P21/00
Abstract: 本发明公开了一种高活性无细胞蛋白表达试剂盒，该试剂盒包括：无细胞蛋白表达冻干粉和谷氨酸镁，无细胞蛋白表达冻干粉用下述方法制成：(1)称取谷氨酸镁和组合物1，混合；(2)向步骤(1)获得的混合物中，加入组合物2，混合均匀；(3)冷冻干燥，得到无细胞蛋白表达冻干粉。本发明的试剂盒能具有较高的蛋白表达活性，是实现无细胞蛋白合成体系的常温存储和应用的前提和保障。本发明的高活性无细胞蛋白表达试剂盒，储存及运输方便。
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公开(公告)号：CN107298699A
公开(公告)日：2017-10-27
申请号：CN201710599159.3
申请日：2017-07-21
Applicant: 天津大学
IPC: C07K14/00
CPC classification number: C07K14/00
Abstract: 本发明公开了一种通过添加大分子拥挤试剂高效体外生物生产蛋白质的配方及方法，配方包括用于生产蛋白质的细胞提取物，用于生产蛋白质的外加反应物，用于生产蛋白质的基因质粒，浓度为10-300mg/ml大分子拥挤试剂水溶液，大分子拥挤试剂为葡聚糖、聚蔗糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、牛血清白蛋白或血红蛋白。本发明的方法能够提高体外生物生产蛋白质产量，并满足蛋白类药物研发高通量、快速筛选的要求。
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公开(公告)号：CN106636016B
公开(公告)日：2020-03-17
申请号：CN201710104570.9
申请日：2017-02-24
Applicant: 天津大学
IPC: C12N7/04
Abstract: 本发明公开一种通过正负电荷引入辅助病毒样颗粒自组装的方法和应用。通过构建病毒样颗粒结构蛋白的两种突变体，其一通过精氨酸或者赖氨酸等酸性氨基酸引入正电荷，另一通过谷氨酸或天冬氨酸等碱性氨基酸引入负电荷，通过正负电荷间的静电吸引提高病毒样颗粒的自组装效率和稳定性。通过该方法在鼠多瘤病毒样颗粒结构蛋白VP1中引入正负电荷，获得两种突变体，包括带正电的m+VP1和带负电的m‑VP1，并将两种突变体混合进行自组装。电子透射显微镜、紫外实时监测和紫外浊点变温法等实验证实，通过两种突变体之间的静电作用力，可有效提升自组装效率和热稳定性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108504669A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810235694.5
申请日：2018-03-21
Applicant: 天津大学
Abstract: 本发明公开了一种含小分子糖的体外高效合成蛋白质的系统，包括组合物1、组合物2、基因及小分子糖水溶液；所述的组合物1包括细胞破碎产物、缓冲溶液1和缓冲溶液2；所述的组合物2包括氨基酸水溶液、反应缓冲液、能量补充液和浓度为5-150μg/ml的核糖核酸聚合酶水溶液：本发明的系统能提高无细胞蛋白合成系统体外生产蛋白质的产量，方法简便快速，可满足目前蛋白质结构和功能组学研究要求。
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公开(公告)号：CN111019938A
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201911244562.X
申请日：2019-12-06
Applicant: 天津大学
Abstract: 本发明公开了一种带有粘性末端的长链DNA及制备方法，制备方法：向EP管中加入带有粘性末端的双链线性DNA前引物和带有粘性末端的双链线性DNA后引物，使两者终浓度相等且为0.1-2.0μM，目标DNA序列，使终浓度为0.1-3ng/μl，和1╳DNA聚合酶，最后使用去离子水补齐50μl体系，置于PCR仪中，进行PCR扩增，得到带有粘性末端的长链DNA。本发明的带有粘性末端的双链线性DNA前、后引物，热稳定性好，可承受90℃以上的高温而不被解链。本发明构建的带有粘性末端的长链DNA，作为一种生物相容性极好的材料，还可以作为大片段DNA合成的基础板块。
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公开(公告)号：CN110055270A
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201910182969.8
申请日：2019-03-12
Applicant: 天津大学
Abstract: 本发明公开了一种用于提高无细胞蛋白表达的基因载体系统及其制备方法，其中的基因载体系统是双巯基修饰的三枝状DNA支架修饰的基因中的双巯基与金纳米颗粒连接。本发明的基因载体系统，在分子水平上拉近表达基因之间的空间距离，并应用于无细胞蛋白生产，由于表达基因空间距离的拉近，可以大大提高蛋白表达产量和生产效率。
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公开(公告)号：CN111019938B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN201911244562.X
申请日：2019-12-06
Applicant: 天津大学
Abstract: 本发明公开了一种带有粘性末端的长链DNA及制备方法，制备方法：向EP管中加入带有粘性末端的双链线性DNA前引物和带有粘性末端的双链线性DNA后引物，使两者终浓度相等且为0.1‑2.0μM，目标DNA序列，使终浓度为0.1‑3ng/μl，和1╳DNA聚合酶，最后使用去离子水补齐50μl体系，置于PCR仪中，进行PCR扩增，得到带有粘性末端的长链DNA。本发明的带有粘性末端的双链线性DNA前、后引物，热稳定性好，可承受90℃以上的高温而不被解链。本发明构建的带有粘性末端的长链DNA，作为一种生物相容性极好的材料，还可以作为大片段DNA合成的基础板块。
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公开(公告)号：CN107298699B
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN201710599159.3
申请日：2017-07-21
Applicant: 天津大学
IPC: C07K14/00
Abstract: 本发明公开了一种通过添加大分子拥挤试剂高效体外生物生产蛋白质的配方及方法，配方包括用于生产蛋白质的细胞提取物，用于生产蛋白质的外加反应物，用于生产蛋白质的基因质粒，浓度为10‑300mg/ml大分子拥挤试剂水溶液，大分子拥挤试剂为葡聚糖、聚蔗糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、牛血清白蛋白或血红蛋白。本发明的方法能够提高体外生物生产蛋白质产量，并满足蛋白类药物研发高通量、快速筛选的要求。
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