一种具有荧光信号放大功能的三维DNA微球及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN112946266B

    公开(公告)日:2024-03-12

    申请号:CN202110153261.7

    申请日:2021-02-03

    Abstract: 本发明公开了一种具有荧光信号放大功能的三维DNA微球及其制备方法与应用,属于分析检测领域。一种三维DNA微球与β‑内酰胺酶抗体结合形成Ab‑DNF材料,能特异性识别耐药菌产生的β‑内酰胺酶。本发明还公开了一种利用上述Ab‑DNF材料构建单分子检测平台的方法,在384孔板上通过三明治夹心免疫反应,使Ab‑DNF材料与抗原结合并被荧光染料染色形成均匀的荧光点。荧光点数与β‑内酰胺酶浓度之间存在线性关系,从而实现对β‑内酰胺酶的定量检测。此方法灵敏度高,特异性好,简便快速,对β‑内酰胺酶的检测线性范围为100aM~1pM,最低检出限为100aM;对β‑内酰胺类耐药菌的检出限为10CFU/mL,检测时间30min,达到了快速检测的要求。

    一种用于蛋白酶控制释放的材料及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN112852924B

    公开(公告)日:2022-11-08

    申请号:CN202110048082.7

    申请日:2021-01-14

    Inventor: 刘猛 张郁新 石蒙

    Abstract: 本发明公开了一种用于蛋白酶控制释放的材料及其制备方法与应用,属于分析检测领域。本发明首先通过RCA反应制备三维功能核酸(3D DNA),3D DNA结构中包含可与待测物质碱基互补配对的核苷酸序列或者可与待测物质特异性结合的适配体,利用待测物质与核苷酸序列或者适配体结合过程中3D DNA结构尺度的微小变化,在数分钟内,释放被控的蛋白酶,在比色纸芯片加入TMB/H2O2显色底物后发生反应,产生颜色变化,显色深浅与待测物的含量成正比,整个检测过程约16min,检测成本低廉;与现有技术相比,本发明步骤简单、耗时短,可实现对待测物的快速现场定量检测。

    一种现场快速定量检测水中藻毒素的纸芯片器件及其应用

    公开(公告)号:CN112924663B

    公开(公告)日:2022-08-16

    申请号:CN202110090874.0

    申请日:2021-01-22

    Abstract: 本发明公开了一种现场快速定量检测水中藻毒素的纸芯片器件及其应用,属于小分子检测技术领域。通过喷蜡打印技术和生物修饰制备纸芯片,基于竞争酶联免疫吸附原理,将样品与酶标记的藻毒素混合,两者同时竞争反应芯片中的捕获位点,过量的酶标记藻毒素被洗涤至比色芯片中,在比色芯片加入TMB/H2O2显色底物后反应产生颜色变化。整个检测过程不超过10min,检测成本低廉;与商品化的检测试纸相比,将反应区域与显色区域分离,调整了颜色信号输出与检测物浓度的比例关系,能够更加准确、清晰的体现出藻毒素的真实含量,不易造成混淆;与传统的检测方法相比,本发明解决了样品前处理复杂、成本高、耗时长等问题,实现了对藻毒素的快速现场定量检测。

    一种基于脱氧核酶的细胞外ATP快速传感方法及应用试剂盒

    公开(公告)号:CN112877329B

    公开(公告)日:2022-06-21

    申请号:CN202110128005.2

    申请日:2021-01-29

    Inventor: 刘猛 石蒙 赵丹

    Abstract: 本发明公开了一种基于脱氧核酶的细胞外ATP快速传感方法及应用试剂盒,属于分析检测领域。一种脱氧核酶,所述脱氧核酶包括核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的脱氧核苷酸链,在SEQ ID NO.2所示的脱氧核苷酸链的5'端连有羟基,3'端连有胆固醇分子。一种基于脱氧核酶的细胞外ATP快速传感方法的步骤简单、响应快速,可实现对细胞外分泌ATP分子的快速传感与测定,可有效区分其他细胞外核苷酸包括ADP、AMP和腺苷等物质,实现准确测定,可广泛应用于细胞生长、组织损伤、炎症和移植免疫等各种生理和病理研究过程中,可更好地理解ATP的信号机制以及其在基本病理、生理过程中的功能。

    一种现场快速定量检测水中藻毒素的纸芯片器件及其应用

    公开(公告)号:CN112924663A

    公开(公告)日:2021-06-08

    申请号:CN202110090874.0

    申请日:2021-01-22

    Abstract: 本发明公开了一种现场快速定量检测水中藻毒素的纸芯片器件及其应用,属于小分子检测技术领域。通过喷蜡打印技术和生物修饰制备纸芯片,基于竞争酶联免疫吸附原理,将样品与酶标记的藻毒素混合,两者同时竞争反应芯片中的捕获位点,过量的酶标记藻毒素被洗涤至比色芯片中,在比色芯片加入TMB/H2O2显色底物后反应产生颜色变化。整个检测过程不超过10min,检测成本低廉;与商品化的检测试纸相比,将反应区域与显色区域分离,调整了颜色信号输出与检测物浓度的比例关系,能够更加准确、清晰的体现出藻毒素的真实含量,不易造成混淆;与传统的检测方法相比,本发明解决了样品前处理复杂、成本高、耗时长等问题,实现了对藻毒素的快速现场定量检测。

    一种用于蛋白酶控制释放的材料及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN112852924A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202110048082.7

    申请日:2021-01-14

    Inventor: 刘猛 张郁新 石蒙

    Abstract: 本发明公开了一种用于蛋白酶控制释放的材料及其制备方法与应用,属于分析检测领域。本发明首先通过RCA反应制备三维功能核酸(3D DNA),3D DNA结构中包含可与待测物质碱基互补配对的核苷酸序列或者可与待测物质特异性结合的适配体,利用待测物质与核苷酸序列或者适配体结合过程中3D DNA结构尺度的微小变化,在数分钟内,释放被控的蛋白酶,在比色纸芯片加入TMB/H2O2显色底物后发生反应,产生颜色变化,显色深浅与待测物的含量成正比,整个检测过程约16min,检测成本低廉;与现有技术相比,本发明步骤简单、耗时短,可实现对待测物的快速现场定量检测。

    一种基于脱氧核酶的细菌高通量定量检测系统与应用

    公开(公告)号:CN115109679A

    公开(公告)日:2022-09-27

    申请号:CN202210524790.8

    申请日:2022-05-13

    Abstract: 本发明公开了一种基于脱氧核酶的细菌高通量定量检测系统与应用,属于生物检测技术领域。该系统包括:电源模块、供压模块、微流控液滴生成模块、荧光检测模块和光电转换模块。微流控液滴生成模块将包含细菌的水相与油相共混,实现单细菌包裹,在细菌包裹后,在液滴生成模块中进行短时的孵育,完成目标物识别;存在细菌的液滴会产生强烈的荧光信号,被荧光检测器检测,经光电转换装置传输至电脑,进行细菌计数。本系统采用微液滴反应模式,将每个步骤高度集成化,减小人为操作和实验误差,更重要的是提高检测速度和通量,弥补了传统培养方法的弊端;并结合新型的分子生物学方法提高了定性和定量的准确性;装置结构简单,易于在实验室推广使用。

    一种脱氧核酶探针在大肠杆菌耐药表型高通量传感中的应用

    公开(公告)号:CN114058678A

    公开(公告)日:2022-02-18

    申请号:CN202111282785.2

    申请日:2021-11-01

    Abstract: 本发明公开了一种脱氧核酶探针在大肠杆菌耐药表型高通量传感中的应用,属于分析检测领域。所述脱氧核酶探针包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的脱氧核苷酸链,以SEQ ID NO.2为底物链,SEQ ID NO.2含有一个RNA碱基A,且在该碱基两侧的T碱基上分别连接荧光基团F和荧光猝灭基团Q。在识别特异性目标蛋白后,SEQ ID NO.1将SEQ ID NO.2链切割至短链,进而产生荧光。该检测原理与具有高通量检测能力的液滴微流控系统相结合,可实现大肠杆菌的快速、高通量检测,并可有效区分耐药型和非耐药型大肠杆菌,进行细菌耐药表型分析,实现准确测定,可广泛应用于实际样本中大肠杆菌的耐药类型诊断,对实现污染控制、进一步防止抗生素滥用、阻止多药耐药菌的形成等方面具有重大意义。

    一种利用纸芯片对基因组损伤位点数进行绝对定量的检测方法与应用

    公开(公告)号:CN112941156A

    公开(公告)日:2021-06-11

    申请号:CN202110083574.X

    申请日:2021-01-21

    Abstract: 本发明公开了一种利用纸芯片对基因组损伤位点数进行绝对定量的检测方法与应用,属于分析检测领域。利用末端脱氧核苷酸转移酶TdT催化核酸标记荧光染料FITC‑dUTP聚合到DNA链3’‑OH的末端,并利用纤维素纸有限尺寸的孔道结构对聚合反应的程度进行有效控制,实现了TdT对DNA链3’‑OH末端的有限聚合。与溶液中聚合反应的均一性较差相比,纤维素纸孔道中的聚合反应更加均一,且聚合FITC‑dUTP的数量随孔径的减小而减小,聚合度不随DNA序列而改变,方法具有普适性。损伤的基因组可经DNA修复酶作用转化为3’‑OH断裂类型的损伤,在纤维素纸中对该末端进行荧光标记可实现绝对定量检测,同时利用该方法也可实现对细胞修复能力的评估。

    一种基于脱氧核酶的细胞外ATP快速传感方法及应用试剂盒

    公开(公告)号:CN112877329A

    公开(公告)日:2021-06-01

    申请号:CN202110128005.2

    申请日:2021-01-29

    Inventor: 刘猛 石蒙 赵丹

    Abstract: 本发明公开了一种基于脱氧核酶的细胞外ATP快速传感方法及应用试剂盒,属于分析检测领域。一种脱氧核酶,所述脱氧核酶包括核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的脱氧核苷酸链,在SEQ ID NO.2所示的脱氧核苷酸链的5'端连有羟基,3'端连有胆固醇分子。一种基于脱氧核酶的细胞外ATP快速传感方法的步骤简单、响应快速,可实现对细胞外分泌ATP分子的快速传感与测定,可有效区分其他细胞外核苷酸包括ADP、AMP和腺苷等物质,实现准确测定,可广泛应用于细胞生长、组织损伤、炎症和移植免疫等各种生理和病理研究过程中,可更好地理解ATP的信号机制以及其在基本病理、生理过程中的功能。

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