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公开(公告)号：CN120059956A
公开(公告)日：2025-05-30
申请号：CN202510235363.1
申请日：2025-02-28
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于微生物筛选技术领域，公开了一种产(+)γ内酰胺酶的苏云金芽孢杆菌的筛选方法。以(±)γ‑内酰胺为唯一碳源，才用平板筛选法初筛、高效液相色谱技术进行复筛，从深海海泥样品中成功筛选到一株产(+)γ‑内酰胺的菌株，鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。该发明为海洋资源开发利用提供了参考，为产(+)γ‑内酰胺酶菌株提供了新途径。
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公开(公告)号：CN118879654A
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202411292321.3
申请日：2024-09-14
Applicant: 大连大学
IPC: C12N9/06
Abstract: 本发明属于生物工程领域，公开了一种产尿酸氧化酶菌株发酵条件的优化方法。包括进行Plackett‑Burman试验设计，对影响尿酸氧化酶发酵的上述5个因素的显著性进行考察，其次进行最陡爬坡实验，根据Plackett‑Burman试验结果中三个显著影响因素效应的大小来设定步长及变化方向，找出峰值，快速逼近最佳值区域；最后通过Box‑Behnken试验设计，运用Design‑Expert 13软件进行回归分析，得到各因素的最佳水平。本发明优化后的发酵条件得到的尿酸氧化酶酶活预测值为56.129U/mL，较基础培养基约提高了1.19倍。
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公开(公告)号：CN118853617A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411292425.4
申请日：2024-09-14
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于发酵工程领域，公开了一种尿酸氧化酶生产菌株的发酵培养基及发酵方法。发酵培养基，按重量百分比计，包括：尿酸0.5％～1％，酵母膏0.5％～1.5％，K2HPO40.1％～0.2％，KH2PO40.02％～0.04％，MgSO40.03％～0.06％。本发明提供的发酵培养基及发酵方法对尿酸氧化酶生产菌株进行发酵培养，使尿酸氧化酶的酶活力约达到48.7U/mL，比现有尿酸氧化酶发酵培养基发酵所得的酶活力提高了89.5％。
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公开(公告)号：CN118460427A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410680231.5
申请日：2024-05-29
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种产海洋低温(‑)γ‑内酰胺酶氧化微杆菌的发酵方法。发酵温度28℃、初始pH 7.0、接种量2vt％(体积比)、装液量45％(112.5mL/250mL)、转速220r/min、发酵时间60h。本发明发酵方法得到的(‑)γ‑内酰胺酶酶活力平均值为3566.26±87.13U/L，相比现有技术的酶酶活力2897.56U/L，酶活力提高23.28％，菌株经本发明发酵方法培养后，酶活力显著上升，具有较强的(±)γ‑内酰胺拆分能力，此发明为氧化微杆菌的资源开发利用提供了参考，具有显著的经济效益及社会价值。
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公开(公告)号：CN118460425A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410680205.2
申请日：2024-05-29
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于微生物筛选及发酵领域，公开了一株产(‑)γ‑内酰胺酶的氧化微杆菌的筛选方法。本发明以(±)γ‑内酰胺为唯一碳源，才用平板筛选法初筛、高效液相色谱技术进行复筛，从深海海泥样品中成功筛选到一株产(‑)γ‑内酰胺的菌株，鉴定为氧化微杆菌(Microbacterium hydrocarbonoxydans)。该发明为海洋资源开发利用提供了参考，为产(‑)γ‑内酰胺酶菌株提供了新途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118421613A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410663785.4
申请日：2024-05-27
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种提升菌株产低温肌氨酸氧化酶酶活的复合诱变方法。对蜡样芽孢杆菌Q5进行亚硝酸钠‑紫外复合诱变，诱变条件为紫外诱变120s和亚硝酸钠诱变25min。得到正突变效果最佳的突变株，其产肌氨酸氧化酶酶活达到2.98U/mL。
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公开(公告)号：CN108956500B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201810895330.X
申请日：2018-08-08
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明是一种低温苹果酸脱氢酶醋酸浓度检测试剂盒及其检测方法。所述试剂盒由乙酰辅酶A合成酶5～50U/L、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐0.5～2.5g/L和辅酶A 5～50U/L，L‑苹果酸0.5～2.5g/L，NADH 7.5mmol/L，低温苹果酸脱氢酶5～500U/L，柠檬酸合酶5～500U/L组成；检测方法为：将醋酸样品加入乙酰辅酶A合成酶、ATP和辅酶A反应，将NAD+、L‑苹果酸与低温苹果酸脱氢酶依次加入上述反应液中，混匀之后立刻加入柠檬酸合酶，全程在340nm下测量NADH的吸光度值，依据公式得到醋酸浓度。本发明试剂盒在4℃、20℃、37℃环境中及高盐环境下即可使用，操作简单，检测醋酸浓度准确性高，稳定性好。
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公开(公告)号：CN110066849A
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201910271075.6
申请日：2019-04-04
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明涉及一种细菌筛选的技术领域，具体是一种产胆固醇氧化酶菌株的筛选方法。本发明经初筛，将样品用无菌水稀释后，经过富集，再涂布于以胆固醇为唯一碳源的筛选平板上，挑选能够产生蓝紫色的菌株；再经过复筛，将初筛菌株经活化后接种到发酵培养基中，20-30℃培养48h测定胞外胆固醇氧化酶活性。本发明筛选方法高效准确，能够获得高产胆固醇氧化酶的菌株；酶活测定方法，操作简便迅速、灵敏度高，同时保证了测定过程中的安全性。
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公开(公告)号：CN109957553A
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201910270729.3
申请日：2019-04-04
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明涉及一种产肌氨酸氧化酶的芽孢杆菌的发酵产酶方法，属于生物工程领域。以保藏号为CGMCC No.17306的LYH18菌株为菌种进行发酵产酶，进而制备肌氨酸氧化酶。通过筛选优化所得的发酵培养基和产酶方法具有发酵周期端，条件温和，易于控制，提供的最佳发酵条件，具有产酶效率高，且酶活力高，酶活力稳定等优点，有利于后一步进行应用方面研究。
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公开(公告)号：CN109880809A
公开(公告)日：2019-06-14
申请号：CN201910151123.8
申请日：2019-02-28
Applicant: 大连大学
Abstract: 本发明属于生物工程领域，特别涉及一种产低温葡萄糖氧化酶的基因工程菌及其制备方法。产低温葡萄糖氧化酶的基因工程菌是以CGMCCNO.17228为出发菌株，通过基因合成获得基因，并构建表达载体pET28a-GOD，将表达载体倒入大肠杆菌BL21构建获得所述的产低温葡萄糖氧化酶的基因工程菌E.coli BL21/pET28a。本发明还提供了所述产GOD的基因工程菌用于发酵生产GOD的应用。构建一种能大幅提高低温葡萄糖氧化酶产量、缩短发酵时间的基因工程菌，从而解决了现有野生菌株活力低，发酵时间长等缺点，具有广泛的工业应用前景。
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