公开(公告)号：CN116376833A

公开(公告)日：2023-07-04

申请号：CN202211589615.3

申请日：2022-12-12

Applicant: 复旦大学附属肿瘤医院

Inventor： 章真 ,  华国强 ,  穆培源 ,  吕涛 ,  夏凡 ,  申丽君 ,  周淑娟

IPC: C12N5/09 ,  C12N5/071 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明提供了一种保留免疫细胞的结肠癌类器官构建方法，包括以下步骤：新鲜结肠癌组织的清洗和机械性切碎；切碎的组织块置于用离心管中，离心去除上清并用专用培养基重悬组织获得组织块悬液；向transwell小室的底部加入专用基质，放置于细胞培养箱待基质凝固；将组织块悬液与解冻的基质胶混合，接种于transwell小室底部凝固的基质上层；待基质胶凝固后，在transwell小室下层加入专用培养基。本发明还提供了通过所述方法获得的结肠癌类器官在结直肠癌小鼠模型构建、结直肠机理研究、药物筛选、疗法评估中的应用。

公开(公告)号：CN106497882A

公开(公告)日：2017-03-15

申请号：CN201610923668.2

申请日：2016-10-29

Applicant: 复旦大学 ,  复旦大学附属肿瘤医院

Inventor： 华国强 ,  梁丽萍 ,  章真 ,  姚晔 ,  富国祥 ,  高建军 ,  李远闯

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N5/09 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明属于分子生物技术领域，具体涉及共同过表达R-spondin1和Noggin细胞株(CHO-Rspon-Noggin)及其构建方法和在肠道干细胞培养中的应用。本发明细胞株同时过表达人R-spondin1和人Noggin两个基因，能稳定分泌出R-spondin1和Noggin两个细胞因子在其细胞上清液中，用该上清液配制的培养基可以培养小鼠肠道干细胞和人肠道干细胞及肠道肿瘤，并生长成与来源一致的类器官“迷你肠子”。“迷你肠子”在研究肠道干细胞，肠道肿瘤的发生发展转移以及肠道肿瘤的治疗包括放疗、化疗、靶向治疗等方面具有独特的优势，因此CHO-Rspon-Noggin细胞株在“迷你肠子”培养及后续研究中具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN116138216A

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202211589683.X

申请日：2022-12-12

Applicant: 复旦大学附属肿瘤医院

Inventor： 章真 ,  华国强 ,  吕涛 ,  穆培源 ,  夏凡 ,  申丽君 ,  李潇萌

IPC: A01K67/027 ,  C12N5/09 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明提供了一种氟尿嘧啶原发性耐药直肠癌类器官小鼠模型的构建方法，包括如下步骤：1)获取临床上对氟尿嘧啶治疗耐药患者的直肠癌活检组织；2)体外培养消化后组织建立直肠癌类器官模型；3)将对氟尿嘧啶耐药的直肠癌类器官进行小鼠皮下植瘤，建立氟尿嘧啶耐药直肠癌类器官小鼠模型。该模型可以用于氟尿嘧啶类药物耐药的分子机制探究和新药开发过程中的临床前药物的疗效和安全性测试。

公开(公告)号：CN108823169A

公开(公告)日：2018-11-16

申请号：CN201810844841.9

申请日：2018-07-27

Applicant: 复旦大学附属肿瘤医院 ,  复旦大学

Inventor： 章真 ,  华国强 ,  徐小雅 ,  姚晔 ,  杨立峰 ,  高建军

IPC: C12N5/09 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开一种从哺乳动物癌组织制备类癌组织的方法，包括以下步骤：A1)将从哺乳动物分离的癌组织置于专用消化液中进行消化，分离为细胞；A2)将细胞置于用BSA润洗的离心管中，离心，去上清；A3)向离心管加入专用培养基，重悬细胞；A4)将细胞悬液与解冻的基质胶混合，接种于培养板，待基质胶凝固，加入专用培养基培养；本发明还公开了类癌组织及其应用；本发明提供了可用于评估术前新辅助放化疗疗效的类癌组织及其功能，以及能够高效培养类癌组织的培养基、消化液、方法。

公开(公告)号：CN111197031A

公开(公告)日：2020-05-26

申请号：CN202010108753.X

申请日：2020-02-21

Applicant: 复旦大学附属肿瘤医院

Inventor： 彭俊杰 ,  华国强 ,  蔡三军 ,  张龙 ,  李雅琪 ,  胡祥 ,  莫少波

IPC: C12N5/09

Abstract: 本发明提供了一种源于循环肿瘤细胞的肠癌类器官培养和传代的方法，该方法包括如下步骤：(1)使用人结直肠癌循环肿瘤细胞类器官培养基与Matrigel按照1:1的比例进行混合制成种板胶；(2)将5.5μm孔径的细胞过滤器从转移性结直肠癌患者血液中捕获的细胞使用种板胶进行重悬之后滴加至24孔板内；(3)待种板胶凝固之后在其周围加入人结直肠癌循环肿瘤细胞类器官培养基进行培养；(4)传代时，将原有培养基弃掉，加入TrypLE消化液进行消化；(5)使用含有10％FBS的DMEM培养基终止消化之后，使用PBS清洗2次，重新使用种板胶进行重悬种板即可。本发明提供的源于循环肿瘤细胞的肠癌类器官培养和传代的方法，为研究循环肿瘤细胞所导致的转移及耐药机制研究提供实验模型，同时可进行药物敏感性筛选，为晚期肠癌个体化治疗提供有效依据。