公开(公告)号：CN115029346B

公开(公告)日：2024-01-02

申请号：CN202210500081.6

申请日：2022-04-22

Applicant: 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院

Inventor： 舒易来 ,  李华伟 ,  陈兵 ,  郭洋 ,  韩磊

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/864 ,  A61K48/00 ,  A61K38/46 ,  A61P27/16 ,  A23L33/00

Abstract: 本发明公开了一种用于靶向敲降Htra2转录本的CRISPR/CasRx系统及应用，该系统包括特异性靶向Htra2 mRNA的sgRNA以及CasRx，并通过腺相关病毒载体递送，形成有效敲降Htra2转录本的RNA编辑系统。本发明通过实验评价所述的CRISPR/CasRx系统对新霉素诱导的小鼠听力损失的影响，结果发现该RNA编辑系统能特异性敲降小鼠中的Htra2转录本，且新霉素造模小鼠注射治疗系统后，可观察到听力功能的恢复，同时还观察到内外毛细胞存活率的提高、纤毛形态变规则，直观地验证了本发明提供的AAV‑CasRx治疗系统对氨基糖苷类药物导致的耳毒性损伤的(56)对比文件胡袁等.运用改良的CRISPR/Cas9系统建立HtrA2敲除细胞株.中国细胞生物学学报.2014,第36卷第1644-1648页.潘宏.CRISPR基因编辑相关新技术的优化与完善研究.中国优秀博士学位论文全文数据库（电子期刊）基础科学辑.2020,(第06期),第1-143页.Yang Guo等.Specific knockdown ofHtra2 by CRISPR-CasRx prevents acquiredsensorineural hearing lossinmice.Molecular Therapy: NucleicAcids.2022,第28卷第643-655页.Xi Gu等.Prevention of acquiredsensorineural hearing loss in mice by invivo Htra2 gene editing.GenomeBiology.2021,第22卷第1-23页.杨大志等.新霉素致损小鼠听觉上皮后线粒体转录因子B1与毛细胞凋亡的关系.第三军医大学学报.2015,第37卷(第02期),第101-105页.

公开(公告)号：CN115029346A

公开(公告)日：2022-09-09

申请号：CN202210500081.6

申请日：2022-04-22

Applicant: 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院

Inventor： 舒易来 ,  李华伟 ,  陈兵 ,  郭洋 ,  韩磊

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/864 ,  A61K48/00 ,  A61K38/46 ,  A61P27/16 ,  A23L33/00

Abstract: 本发明公开了一种用于靶向敲降Htra2转录本的CRISPR/CasRx系统及应用，该系统包括特异性靶向Htra2 mRNA的sgRNA以及CasRx，并通过腺相关病毒载体递送，形成有效敲降Htra2转录本的RNA编辑系统。本发明通过实验评价所述的CRISPR/CasRx系统对新霉素诱导的小鼠听力损失的影响，结果发现该RNA编辑系统能特异性敲降小鼠中的Htra2转录本，且新霉素造模小鼠注射治疗系统后，可观察到听力功能的恢复，同时还观察到内外毛细胞存活率的提高、纤毛形态变规则，直观地验证了本发明提供的AAV‑CasRx治疗系统对氨基糖苷类药物导致的耳毒性损伤的改善作用，可用于制备防治获得性感音神经性聋的药物或保健品。