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公开(公告)号:CN101597617B
公开(公告)日:2012-05-02
申请号:CN200910054031.4
申请日:2009-06-26
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属微生物领域,涉及一种用于革兰氏阳性菌的高效转座系统pBTn,采用温度敏感性质粒pBT2作为载体,其成功转入目的菌中后,通过升高培养温度而被去除;温度敏感性质粒中插入两端带有重复序列的红霉素的耐药基因,在红霉素的耐药基因和来源于mariner真核转座子的转座酶间插入来源于pTX15的启动子,该启动子在葡萄糖存在下被遏制表达,在无葡萄糖,木糖存在可活化,能有效地控制转座酶表达的时间。本发明建立的转座子突变文库无明显插入热点,具有高度随机性和单一性插入到革兰氏阳性菌基因组的特点。实用性明显高于目前被广泛使用于原核生物的转座系统Tn551或Tn917。
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公开(公告)号:CN101597617A
公开(公告)日:2009-12-09
申请号:CN200910054031.4
申请日:2009-06-26
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属微生物领域,涉及一种用于革兰氏阳性菌的高效转座系统pBTn,采用温度敏感性质粒pBT2作为载体,其成功转入目的菌中后,通过升高培养温度而被去除;温度敏感性质粒中插入两端带有重复序列的红霉素的耐药基因,在红霉素的耐药基因和来源于mariner真核转座子的转座酶间插入来源于pTX15的启动子,该启动子在葡萄糖存在下被遏制表达,在无葡萄糖,木糖存在可活化,能有效地控制转座酶表达的时间。本发明建立的转座子突变文库无明显插入热点,具有高度随机性和单一性插入到革兰氏阳性菌基因组的特点。实用性明显高于目前被广泛使用于原核生物的转座系统Tn551或Tn917。
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公开(公告)号:CN102453752A
公开(公告)日:2012-05-16
申请号:CN201010519944.1
申请日:2010-10-26
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 复旦大学附属金山医院
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明属于微生物检验领域,涉及运用高分辨率熔解曲线法对血流感染的细菌快速鉴定。本发明首先对血培养阳性的培养瓶进行涂片、革兰染色,区分阴性菌与阳性菌,然后针对阴性菌和阳性菌选择扩增16S不同片段,同时高分辨率熔解曲线方法分析。本发明针对血流感染常见的病原菌,包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌、产酸克雷伯杆菌,洛菲不动杆菌、产气肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌。本法能够快速、高效、准确的测定血流感染的常见病原菌,为后续的治疗提供有力的依据,争取宝贵的时间。
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公开(公告)号:CN101560480A
公开(公告)日:2009-10-21
申请号:CN200910006605.0
申请日:2009-01-24
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 上海交通大学
Abstract: 本发明属于微生物动物细胞系领域,涉及一株携带有与细菌生长有关的新基因组岛KpGI-2的肺炎克雷伯临床耐药菌株HS04160。已于2008年6月25日保藏,保藏单位:CGMCC,北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所,保藏编号:CGMCC No.2558,分类命名:肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae。本发明通过对肺炎克雷伯临床耐药菌株的筛选,得到6.4kb的基因序列并证明其属新的基因组岛,细菌活细胞计数试验证明KpGI-2中携带的基因对细菌的生长分别具有促进/抑制作用,提示该基因组岛与细菌生长相关。本发明实验显示,KpGI-2参与了肺炎克雷伯临床菌株感染的致病过程。所述的含有基因组岛KpGI-2的菌株对于肺炎克雷伯菌株的致病与耐药有着重要影响。
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公开(公告)号:CN101560480B
公开(公告)日:2012-10-24
申请号:CN200910006605.0
申请日:2009-01-24
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 上海交通大学
Abstract: 本发明属于微生物动物细胞系领域,涉及一株携带有与细菌生长有关的新基因组岛KpGI-2的肺炎克雷伯临床耐药菌株HS04160。已于2008年6月25日保藏,保藏单位:CGMCC,北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所,保藏编号:CGMCC No.2558,分类命名:肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae。本发明通过对肺炎克雷伯临床耐药菌株的筛选,得到6.4kb的基因序列并证明其属新的基因组岛,细菌活细胞计数试验证明KpGI-2中携带的基因对细菌的生长分别具有促进/抑制作用,提示该基因组岛与细菌生长相关。本发明实验显示,KpGI-2参与了肺炎克雷伯临床菌株感染的致病过程。所述的的含有基因组岛KpGI-2的菌株对于肺炎克雷伯菌株的致病与耐药有着重要影响。
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公开(公告)号:CN101503670B
公开(公告)日:2011-12-14
申请号:CN200810033538.7
申请日:2008-02-04
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属于微生物动物细胞系领域,具体涉及一种含有整合子的工程菌株。所述工程菌株为大肠埃希菌Eschrichia.coli,保藏编号:CGMCC No.2353,该菌株命名为DHS,其染色体DNA上含有序列1的结构。本发明利用转座子为工具,将含有已知序列的整合子插入到大肠杆菌的染色体DNA上,经试验证实该菌株在高表达整合酶的情况下,能捕获aadA2耐药性基因盒,。该菌株的建立为在已知遗传背景的菌株中深入研究整合子捕获耐药性基因盒的机制奠定了基础,可作为工具菌用于其它有关整合子的研究。
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公开(公告)号:CN101503670A
公开(公告)日:2009-08-12
申请号:CN200810033538.7
申请日:2008-02-04
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属于微生物动物细胞系领域,具体涉及一种含有整合子的工程菌株。所述工程菌株为大肠埃希菌Eschrichia.coli,保藏编号:C6MCC No.2353,该菌株命名为DHS,其染色体DNA上含有序列1的结构。本发明利用转座子为工具,将含有已知序列的整合子插入到大肠杆菌的染色体DNA上,经试验证实该菌株在高表达整合酶的情况下,能捕获aadA2耐药性基因盒。该菌株的建立为在已知遗传背景的菌株中深入研究整合子捕获耐药性基因盒的机制奠定了基础,可作为工具菌用于其它有关整合子的研究。
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