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公开(公告)号：CN101892326B
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201010229583.7
申请日：2010-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种用于病毒PCR检测的标准品的制备方法。本发明的步骤包括：筛选扩增特定长度片段的大肠杆菌引物；设计包含病毒特异性引物和大肠杆菌引物的合并引物；使用合并引物扩增大肠杆菌基因组；构建包含病毒特异性引物的定量标准品质粒。已构建的标准品质粒的病毒包括肠道病毒，甲肝病毒、手足口病毒、诺瓦克病毒、轮状病毒、人星状病毒、戊肝病毒等。本发明可避免用多种病毒株构建相关病毒标准品过程，减少制备中的潜在危险性，并可快速、同时制备不同病毒质粒标准品。本发明可应用于水体中致病病毒和其它病原体的检测。
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公开(公告)号：CN101892327A
公开(公告)日：2010-11-24
申请号：CN201010231344.5
申请日：2010-07-20
Applicant: 复旦大学
IPC: C12Q1/70
Abstract: 本发明属于生物技术方法领域，具体是从大体积水样中浓缩病毒的方法。该方法包括如下步骤：用纳米陶瓷纤维滤芯使病毒浓缩;用牛肉浸膏及甘氨酸的混合液体洗脱；离心除去细菌；加入PEG及NaCl进行过夜沉淀;离心后沉淀经PBS缓冲液溶解。本发明无需硅藻土进行二次浓缩，避免了二次浓缩带来的损失。本方法回收效率高，操作较硅藻土二次浓缩法简便，浓缩后样品可进一步用于病毒的细胞培养（包括噬菌斑检测）和分子生物学分析，为高效检测水体中的病毒提供基础。
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公开(公告)号：CN101892326A
公开(公告)日：2010-11-24
申请号：CN201010229583.7
申请日：2010-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种用于病毒PCR检测的标准品的制备方法。本发明的步骤包括：筛选扩增特定长度片段的大肠杆菌引物；设计包含病毒特异性引物和大肠杆菌引物的合并引物；使用合并引物扩增大肠杆菌基因组；构建包含病毒特异性引物的定量标准品质粒。已构建的标准品质粒的病毒包括肠道病毒，甲肝病毒、手足口病毒、诺瓦克病毒、轮状病毒、人星状病毒、戊肝病毒等。本发明可避免用多种病毒株构建相关病毒标准品过程，减少制备中的潜在危险性，并可快速、同时制备不同病毒质粒标准品。本发明可应用于水体中致病病毒和其它病原体的检测。
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