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公开(公告)号:CN101353652B
公开(公告)日:2010-12-01
申请号:CN200810137114.5
申请日:2008-09-12
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 角毛壳菌几丁质酶几丁质结合结构域(ChBD)缺失突变体及其基因和制备方法及所用引物,它涉及一种几丁质酶ChBD缺失突变体及其基因和制备方法及所用引物。本发明为几丁质酶ChBD的研究奠定了物质基础。本发明缺失突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。本发明缺失突变体基因序列如SEQID NO:3所示。本发明引物PM1、PM2、PX和PY的基因序列分别如SEQ IDNO:5、6、7和8所示。本发明通过融合PCR法获得缺失突变体基因,再通过转基因克隆技术获得缺失突变体。本发明为几丁质酶ChBD的研究奠定了物质基础,构建了几丁质酶ChBD缺失突变体。
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公开(公告)号:CN101348797A
公开(公告)日:2009-01-21
申请号:CN200810137116.4
申请日:2008-09-12
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 角毛壳菌几丁质酶基因及其编码的氨基酸序列和用于克隆的引物,它涉及一种几丁质酶基因及其编码的氨基酸序列和用于克隆的引物。本发明旨在增加几丁质酶的种类,拓宽几丁质酶的获得途径。本发明角毛壳菌几丁质酶基因序列如SEQ ID NO:1所示。角毛壳菌几丁质酶基因完整的开放读码框的基因序列如SEQ ID NO:2所示。角毛壳菌几丁质酶基因编码的氨基酸序列如SEQ IDNO:3所示。用于克隆角毛壳菌几丁质酶基因的引物P1~P4的基因序列如SEQID NO:4~7所示。本发明角毛壳菌几丁质酶基因是一个新的几丁质酶基因,为酸性内切几丁质酶基因。
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公开(公告)号:CN101348796A
公开(公告)日:2009-01-21
申请号:CN200810137115.X
申请日:2008-09-12
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 角毛壳菌几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物,它涉及一种几丁质酶基因密码子偏爱性突变体基因及其制备方法和所用引物。本发明解决了chi58在巴斯德毕赤酵母中不能高效表达的问题。本发明密码子偏爱性突变体基因序列如SEQ ID NO:2所示。本发明引物Pn1~Pn6的基因序列分别如SEQ ID NO:5、6、7、8、9和10所示。本发明通过融合PCR法获得密码子偏爱性突变体基因。本发明基因与真核表达载体pPIC9K连接构建重组表达载体,再经甲醇诱导后表达的蛋白质分子量为58kD,等电点pI为4.47,经测序检测氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,证实为角毛壳菌几丁质酶,且几丁质酶的酶活性提高了约3倍。
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公开(公告)号:CN101353652A
公开(公告)日:2009-01-28
申请号:CN200810137114.5
申请日:2008-09-12
Applicant: 哈尔滨工业大学
Abstract: 角毛壳菌几丁质酶几丁质结合结构域(ChBD)缺失突变体及其基因和制备方法及所用引物,它涉及一种几丁质酶ChBD缺失突变体及其基因和制备方法及所用引物。本发明为几丁质酶ChBD的研究奠定了物质基础。本发明缺失突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。本发明缺失突变体基因序列如SEQ ID NO:3所示。本发明引物PM1、PM2、PX和PY的基因序列分别如SEQ ID NO:5、6、7和8所示。本发明通过融合PCR法获得缺失突变体基因,再通过转基因克隆技术获得缺失突变体。本发明为几丁质酶ChBD的研究奠定了物质基础,构建了几丁质酶ChBD缺失突变体。
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