导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法

    公开(公告)号:CN102559733A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201210065114.5

    申请日:2012-03-13

    Abstract: 导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法,涉及一种导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法。是要解决目前使用大肠杆菌作为宿主表达clfA基因,研制基因工程疫苗存在侵袭性和毒性问题。方法:提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA;以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得clfA基因;提取保存于大肠杆菌JM109中的质粒pMG36c;分别对clfA基因和质粒pMG36c进行双酶切,将酶切后产物连接;将连接产物转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中,采用氯霉素筛选转化子,构建重组质粒;将重组质粒电转化乳酸乳球菌,即完成。本发明可用于研制基因工程疫苗,安全、无致病性。

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