可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法

    公开(公告)号:CN101280015B

    公开(公告)日:2012-09-05

    申请号:CN200810050556.6

    申请日:2008-04-01

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明的可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法属于生物技术领域。以谷胱甘肽衍生物为靶抗原,通过免疫亲和筛选法对重组噬菌体展示人单链抗体库进行筛选,得到单链抗体B3和D8。将单链抗体基因组装到分泌型原核或真核表达载体上,转化大肠杆菌或酵母细胞,在原核或真核中表达并纯化单链抗体蛋白;用化学突变法在抗体的底物结合部位引入GPX的催化基团SeCys。或用基因突变技术和营养缺陷型大肠杆菌直接表达在底物结合部位含有GPX催化基团的可溶性单链抗体蛋白,赋予抗体以GPX的催化活性。本发明的制备方法简单;制备的人源含硒单链抗体酶活力高;所表达的蛋白为可溶性;有利于大规模生产,在生物制药方面有广阔的应用前景。

    可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法

    公开(公告)号:CN101280015A

    公开(公告)日:2008-10-08

    申请号:CN200810050556.6

    申请日:2008-04-01

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明的可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法属于生物技术领域。以谷胱甘肽衍生物为靶抗原,通过免疫亲和筛选法对重组噬菌体展示人单链抗体库进行筛选,得到单链抗体B3和D8。将单链抗体基因组装到分泌型原核或真核表达载体上,转化大肠杆菌或酵母细胞,在原核或真核中表达并纯化单链抗体蛋白;用化学突变法在抗体的底物结合部位引入GPX的催化基团SeCys。或用基因突变技术和营养缺陷型大肠杆菌直接表达在底物结合部位含有GPX催化基团的可溶性单链抗体蛋白,赋予抗体以GPX的催化活性。本发明的制备方法简单;制备的人源含硒单链抗体酶活力高;所表达的蛋白为可溶性;有利于大规模生产,在生物制药方面有广阔的应用前景。

    硒代木瓜蛋白酶的制备方法

    公开(公告)号:CN1224702C

    公开(公告)日:2005-10-26

    申请号:CN03110835.0

    申请日:2003-01-10

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明的硒代木瓜蛋白酶的制备方法属于生物化学领域,特别涉及制备具有高谷胱甘肽过氧化物酶活性的人工酶的方法。以木瓜蛋白酶、硒氢化钠为原料,工艺步骤分为硒化和后处理两步。所说的硒化,是用磷酸盐缓冲液溶解木瓜蛋白酶,再加入过量的硒氢化钠,氮气保护下进行硒化;所说的后处理,是硒化后冻干,干粉用磷酸盐缓冲液溶解,离心除硒后,经除盐,收集蛋白粉,冻干得硒代木瓜蛋白酶。硒化前可以进行活化处理。本发明具有如下特点:制备方法简单、步骤少;原料稳定、易得、成本低、分离提纯简单方便;制得的产物稳定性好,具有优良的抗氧化性,谷胱甘肽过氧化物酶活力高,适用于工业生产,具有药用潜力及工业应用价值。

    夹心免疫传感法检测小分子蛋白质及肽类的方法

    公开(公告)号:CN1193232C

    公开(公告)日:2005-03-16

    申请号:CN03127631.8

    申请日:2003-07-16

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明的夹心免疫传感法检测小分子蛋白质及肽类的方法属免疫检测领域,特别涉及一种定量检测分子量在20kDa以下蛋白质及肽类的方法。是以镀有金膜的载玻片或三棱镜为检测基片,经组装体形成、第一抗体-抗原二元免疫复合物的形成、第一抗体-抗原-第二抗体夹心三元免疫复合物的形成、共振波长检测等过程完成的。待测抗原是胰岛素、bFGF、T3或T4等;相应的第一抗体和第二抗体应为特异性抗每种待测抗原的单克隆第一抗体和第二抗体,且它们具有互补性。本发明可实时监测生物分子的动态反应过程,能简易直接检测待测物浓度的变化;灵敏度高,无背景干扰;试剂成本低。第二抗体的结合产生了更强的光学信号,发挥了生物学放大作用。

    环糊精衍生物在化妆品中的应用

    公开(公告)号:CN1451369A

    公开(公告)日:2003-10-29

    申请号:CN03119444.3

    申请日:2003-03-13

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及将环糊精衍生物在化妆品领域的应用,该类环糊精衍生物是一种具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的人工模拟酶,其在化妆品中的一般用量范围是0.5~10.0%,它能够有效地保护细胞、抗脂质过氧化、清除人体皮肤细胞内的自由基,起到减少和消除皮肤皱纹、细纹,延缓衰老,预防和治疗色素沉着、黄褐斑、蝴蝶斑,皮肤角质化、皮肤粗糙等作用。本品物化性质稳定、无毒、分子量小、透膜性好、水溶性强等特点,可以制成乳液、膏霜、水剂等化妆品剂型。本发明原料来源简易、生产工艺简便,可产生良好的经济效益。

    硒代木瓜蛋白酶的制备方法

    公开(公告)号:CN1431301A

    公开(公告)日:2003-07-23

    申请号:CN03110835.0

    申请日:2003-01-10

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明的硒代木瓜蛋白酶的制备方法属于生物化学领域,特别涉及制备具有高谷胱甘肽过氧化物酶活性的人工酶的方法。以木瓜蛋白酶、硒氢化钠为原料,工艺步骤分为硒化和后处理两步。所说的硒化,是用磷酸盐缓冲液溶解木瓜蛋白酶,再加入过量的硒氢化钠,氮气保护下进行硒化;所说的后处理,是硒化后冻干,干粉用磷酸盐缓冲液溶解,离心除硒后,经除盐,收集蛋白峰,冻干得硒代木瓜蛋白酶。硒化前可以进行活化处理。本发明具有如下特点:制备方法简单、步骤少;原料稳定、易得、成本低、分离提纯简单方便;制得的产物稳定性好,具有优良的抗氧化性,谷胱甘肽过氧化物酶活力高,适用于工业生产,具有药用潜力及工业应用价值。

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