公开(公告)号：CN117089555A

公开(公告)日：2023-11-21

申请号：CN202311095779.5

申请日：2023-08-29

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 苏瑛杰 ,  陈冰惠 ,  唐珊珊 ,  于潇潇 ,  陈四季 ,  苟泽昌

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/81 ,  C12N15/11 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供的来源于疣孢漆斑菌的基因MvLac5，是一种能编码漆酶的基因。漆酶是木质素降解的关键酶之一，木质纤维原料的高值化利用可有效缓解能源危机，保护生态环境，进一步推动农业的可持续发展。其中，真菌来源的漆酶由于其作为分泌物的胞外酶成分稳定而引起特别关注。本发明通过筛选疣孢漆斑菌的全基因组序列，预测到了一条可能编码漆酶的基因，并将其命名为MvLac5，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，并将所述基因克隆，重组得毕赤酵母得到GS115‑pPICZαB‑MvLac5，测定发酵液中的漆酶活力，其活力为1.645 U/L，证明基因MvLac5是编码漆酶的基因。

公开(公告)号：CN117305137A

公开(公告)日：2023-12-29

申请号：CN202311095994.5

申请日：2023-08-29

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 苏瑛杰 ,  陈冰惠 ,  唐珊珊 ,  于潇潇 ,  陈四季 ,  苟泽昌

IPC: C12N1/15 ,  C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/11 ,  C12N15/80 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供的来源于疣孢漆斑菌的基因MvLac5，是一种能编码漆酶的基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，并将所述基因克隆，重组得到毕赤酵母GS115‑pPICZαB‑MvLac5，测定发酵液中的漆酶活力，其活力为1.645 U/L。本发明提供的漆酶基因MvLac5的同源过表达工程菌及方法，克服了丝状真菌在导入外源基因片段时的困难。本发明的M.verrucaria野生型菌株108 h时漆酶达到最大活力为1676.97 U/L。重组菌株MvLac5‑2相较野生型提高了1.13倍；MvLac5‑7提高了1.19倍；MvLac5‑9提高了2.47倍。取漆酶活力最高的超表达菌株MvLac5‑9进行木质素降解率的分析，结果显示，野生型菌株对碱木质素降解率最高为36.73%，而过表达基因的工程菌的最大降解率高达77.60%，是野生型菌株的2.11倍，说明在M.verrucaria中过表达漆酶基因MvLac5可有效提高菌株的木质素降解能力。