公开(公告)号：CN106282091A

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201610653135.7

申请日：2016-08-10

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 孙永峰 ,  武惠岩 ,  胡静涛 ,  隋玉健 ,  杨辉 ,  柳俭强 ,  王子遒 ,  路洪涛 ,  刘畅

IPC: C12N5/071

CPC classification number: C12N5/0682 ,  C12N2509/00

Abstract: 本发明公开了一种鹅等级前卵泡颗粒细胞的分离方法，包括以下步骤：取产蛋高峰期鹅，处死，清理腹部羽毛后进行酒精消毒，打开腹腔，取出整个卵巢，将取得的卵泡预冷并去血污，漂洗后转移到无菌间；剥离干净卵泡外膜、结缔组织及血管网；将剥离后的卵泡放入新的平皿中，用手术刀在卵泡表面划出切口，将颗粒细胞膜层取出，漂洗干净后剪碎，置于离心管中加培养液，用移液枪反复吹打使其分离；消化；消化结束，加入含血清的培养基终止消化；过滤，收集滤液；沉淀室温离心；弃上清，接种，静置培养。本发明所分离出的颗粒细胞形态，大小均一，呈圆形或椭圆形，且结构完整，边缘分明，坏死细胞数量较少，所分离的颗粒细胞处于健康状态。