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公开(公告)号:CN105238788A
公开(公告)日:2016-01-13
申请号:CN201510776483.9
申请日:2015-11-10
Applicant: 吉林农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种玉米淀粉合成酶SSIIa启动子及其制备表达载体的构建方法,该启动子是以玉米B73基因组DNA为模板,以5’-TGTCAGACTGGTTAGTGGAGC-3’;5’-AGAAGGTGGAGGAAGAGGACG-3’为引物,通过PCR方法扩增获得的一种含有碱基序列为2526bp玉米SSIIa基因序列。本发明为玉米SSII基因启动子序列研究提供理论依据;为组织特异性启动子的开发和应用,为用基因工程手段提高玉米淀粉含量,改良淀粉品质提供了候选胚乳特异性启动子;为明晰整个淀粉合成网络的调控提供理论依据。
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公开(公告)号:CN104046638A
公开(公告)日:2014-09-17
申请号:CN201410202095.5
申请日:2014-05-09
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种拟南芥AAP1基因的克隆及植物表达载体的构建方法,用TRIzol法提取拟南芥幼苗的总RNA,测定OD260/OD280比值,为2.014;将PCR产物进行凝胶回收,回收后的产物与PMD-18T载体进行连接,转化结束后进行质粒的提取,将提取的质粒进行PCR及酶切验证,经过质粒PCR验证,获得了1600bp的DNA条带;测序后发现该基因ORF1458bp,编码485个氨基酸的多肽,用限制性内切酶EcoR I和Xba I将目的基因和pCAMBIA3300载体分别酶切后,将目的基因定向连接到植物表达载体上,经转化结束后进行质粒的提取,将质粒进行PCR及酶切验证;质粒PCR验证,获得了一条为1600bp的DNA条带;经过酶切验证,分别获得了8300bp的pCAMBIA3300载体与为1600bp的目的片段;说明载体构建成功,重新命名为p3300-AAP1。
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