Rassf10基因在制备治疗中枢神经系统损伤药物中的应用

    公开(公告)号:CN117568462A

    公开(公告)日:2024-02-20

    申请号:CN202311479697.0

    申请日:2023-11-08

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了Rassf10基因在制备治疗中枢神经系统损伤药物中的应用。发明人前期发现Rassf10基因在脊髓损伤后表达呈先上升后下降的趋势,同时在体外培养大鼠E18天、出生后1天(P1)和3天(P3)的大脑皮层神经元(再生能力逐渐减弱)中,Rassf10的表达逐渐升高,由此推断Rassf10基因对于中枢神经系统损伤的治疗具有作用。之后通过siRNA转染原代培养的E14天脊髓神经元,进一步验证了干扰Rassf10的表达对于中枢神经系统损伤的治疗具有作用。

    一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN106566844A

    公开(公告)日:2017-04-19

    申请号:CN201610945971.2

    申请日:2016-11-02

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒,采用5’‑磷酸化单链寡聚脱氧核糖核苷酸(5’‑p‑ss‑DNA Oligo)和Argonaute mRNA联合下调基因表达,包括NgAgo基因的改造,表达质粒的构建,表达质粒经过线性化、体外转录、回收步骤获得Argonaute mRNA,根据目的基因序列设计并合成5’‑p‑ss‑DNA Oligo,将Argonaute mRNA和5’‑p‑ss‑DNA Oligo导入靶细胞中等步骤;本发明所述的方法中改造的NgAgo基因能够在靶细胞中快速高效的进入细胞核;5’‑p‑ss‑DNA Oligo序列依据目的基因设计,对靶序列识别具有良好的特异性;5’‑p‑ss‑DNA Oligo/NgAgo系统通过对真核细胞DNA水平的抑制作用,能够稳定高效的下调目的基因表达;5’‑p‑ss‑DNA Oligo具有良好的稳定性,利于在细胞内发挥作用;真核细胞自然条件下不存在内源性的5’‑p‑ss‑DNA Oligo因此特异性高。

    一种克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因敲除突变体的构建方法

    公开(公告)号:CN115772545A

    公开(公告)日:2023-03-10

    申请号:CN202211056541.7

    申请日:2022-08-31

    Applicant: 南通大学

    Inventor: 董张及 刘梅

    Abstract: 本发明公开了一种克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因敲除突变体的构建方法,属于生物技术领域。该方法包括:1)筛选获得可高度特异识别克氏原螯虾基因组中甘露聚糖结合凝集素基因的sgRNA;2)进行性腺注射,在自然交配获得的克氏原螯虾中验证CRISPR/Cas9产生甘露聚糖结合凝集素基因移码突变的能力;3)筛选到含移码突变甘露聚糖结合凝集素基因的克氏原螯虾创建者的子一代,并以子一代为亲本自交,获得去除甘露聚糖结合凝集素功能的突变的甘露聚糖结合凝集素基因的纯合突变基因的新品系。采用该方法可成功地对克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因进行定向突变,使该基因的正常功能丧失,最后获得的甘露聚糖结合凝集素基因突变的纯合子新品系克氏原螯虾缺失该基因功能,成为天然免疫缺陷模型。

    一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN106566844B

    公开(公告)日:2020-04-07

    申请号:CN201610945971.2

    申请日:2016-11-02

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒,采用5’‑磷酸化单链寡聚脱氧核糖核苷酸(5’‑p‑ss‑DNA Oligo)和Argonaute mRNA联合下调基因表达,包括NgAgo基因的改造,表达质粒的构建,表达质粒经过线性化、体外转录、回收步骤获得Argonaute mRNA,根据目的基因序列设计并合成5’‑p‑ss‑DNA Oligo,将Argonaute mRNA和5’‑p‑ss‑DNA Oligo导入靶细胞中等步骤;本发明所述的方法中改造的NgAgo基因能够在靶细胞中快速高效的进入细胞核;5’‑p‑ss‑DNA Oligo序列依据目的基因设计,对靶序列识别具有良好的特异性;5’‑p‑ss‑DNA Oligo/NgAgo系统通过对真核细胞DNA水平的抑制作用,能够稳定高效的下调目的基因表达;5’‑p‑ss‑DNA Oligo具有良好的稳定性,利于在细胞内发挥作用;真核细胞自然条件下不存在内源性的5’‑p‑ss‑DNA Oligo因此特异性高。

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