公开(公告)号：CN106282157A

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201510268154.3

申请日：2015-05-22

Applicant: 南京金斯瑞生物科技有限公司

Inventor： 娄春波 ,  陶勇 ,  赵学金 ,  张莎莎 ,  张丽华 ,  翟春华 ,  柳振宇

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种由短链核苷酸介导的DNA组装方法及其应用。本发明组装方法包括：“长序列”的合成，模块载体的准备及组装，骨架载体的改造及组装，短序列的准备，模块载体、改造过的骨架载体、“短序列”的酶切连接一体化反应等步骤。在本发明中，“短序列”为启动子和RBS等调节元件，“长序列”为基因或者载体的复制起始原点等。“短序列”被设计为可以合成的双链DNA链，在组装过程中既可以连接“长序列”又可以作为条码序列决定组装顺序。操纵子中基因的顺序可以通过合成带有不同粘性末端的“短序列”来实现。本发明方法允许多个因子同时参与通路中基因的调控，可以用来构建生物合成通路的组合文库，达到通量优化通路的目的。

公开(公告)号：CN106282157B

公开(公告)日：2019-11-12

申请号：CN201510268154.3

申请日：2015-05-22

Applicant: 南京金斯瑞生物科技有限公司

Inventor： 娄春波 ,  陶勇 ,  赵学金 ,  张莎莎 ,  张丽华 ,  翟春华 ,  柳振宇

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种由短链核苷酸介导的DNA组装方法及其应用。本发明组装方法包括：“长序列”的合成，模块载体的准备及组装，骨架载体的改造及组装，短序列的准备，模块载体、改造过的骨架载体、“短序列”的酶切连接一体化反应等步骤。在本发明中，“短序列”为启动子和RBS等调节元件，“长序列”为基因或者载体的复制起始原点等。“短序列”被设计为可以合成的双链DNA链，在组装过程中既可以连接“长序列”又可以作为条码序列决定组装顺序。操纵子中基因的顺序可以通过合成带有不同粘性末端的“短序列”来实现。本发明方法允许多个因子同时参与通路中基因的调控，可以用来构建生物合成通路的组合文库，达到通量优化通路的目的。