rRNA探针及其制备方法和应用
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116287126A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310158080.2

    申请日:2023-02-23

    摘要: 本申请公开了一种rRNA探针及其制备方法和应用,所述rRNA探针的制备方法包括以下步骤:从人源细胞中提取总RNA,基于总RNA合成cDNA;分别使用预先设计的引物组,以cDNA为模板进行PCR扩增,得到扩增产物;分别将各扩增产物变性成单链DNA;分别对各单链DNA进行环化处理,得到环化DNA;分别向各环化DNA中加入DNA聚合酶和滚环扩增引物组,进行滚环扩增,得到rRNA长探针;对各rRNA长探针进行超声打断,得到rRNA探针片段;将各rRNA探针片段混合,得到rRNA探针。本申请解决了现有技术去除总RNA中的rRNA成本较高且操作繁杂的技术问题。

    一种去除RNA样本中rRNA的方法
    2.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116254324A

    公开(公告)日:2023-06-13

    申请号:CN202310158079.X

    申请日:2023-02-23

    IPC分类号: C12Q1/6816 C12N15/11

    摘要: 本发明公开一种去除RNA样本中rRNA的方法,首先设计rRNA特异性引物,所述rRNA特异性引物包括28S引物对和18S引物对;接着利用所述rRNA特异性引物对提取的RNA样本进行扩增、变性、环化、纯化,获得纯化产物;利用滚环复制引物组和所述纯化产物制备rRNA长探针;再将所述rRNA长探针与待处理的RNA样本进行混合杂交,然后使用磁珠吸附,获得去除rRNA后的RNA样本。本发明的检测方法仅依靠一步磁珠纯化即可去除样品中的特定序列,不同于现有技术中常用的利用RNaseH、DNAase消化序列方法、这样可以大大节省流程时间、降低建库成本。