公开(公告)号：CN113817762B

公开(公告)日：2023-06-20

申请号：CN202111110911.6

申请日：2021-09-23

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 王昕 ,  廖杨 ,  陈可泉 ,  王静 ,  朱强强 ,  王静雯 ,  徐双 ,  欧阳平凯

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N15/64 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产戊二胺的重组大肠杆菌及其应用。本发明从头合成红螺菌中的二磷酸核酮糖羧化酶基因、菠菜中的磷酸核糖激酶基因和赖氨酸脱羧酶基因，PCR拷贝大肠杆菌分子伴侣基因，构建质粒pTrc99a‑cadA‑cbbM和质粒pCWJ‑prkA‑GroEL/GroES，双质粒重组菌在特定培养基中生长良好，葡萄糖被高效利用。在不同时间段分别加入诱导剂阿拉伯糖和IPTG，异源基因表达稳定，反应体系简单、条件温和、周期短、副产物少，而且清洁无污染，是一条简单、快速、高效的生产途径，从发酵结果中可以看出，重组大肠杆菌KACCPG产量有着明显的提高。

公开(公告)号：CN113817762A

公开(公告)日：2021-12-21

申请号：CN202111110911.6

申请日：2021-09-23

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 王昕 ,  廖杨 ,  陈可泉 ,  王静 ,  朱强强 ,  王静雯 ,  徐双 ,  欧阳平凯

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N15/64 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产戊二胺的重组大肠杆菌及其应用。本发明从头合成红螺菌中的二磷酸核酮糖羧化酶基因、菠菜中的磷酸核糖激酶基因和赖氨酸脱羧酶基因，PCR拷贝大肠杆菌分子伴侣基因，构建质粒pTrc99a‑cadA‑cbbM和质粒pCWJ‑prkA‑GroEL/GroES，双质粒重组菌在特定培养基中生长良好，葡萄糖被高效利用。在不同时间段分别加入诱导剂阿拉伯糖和IPTG，异源基因表达稳定，反应体系简单、条件温和、周期短、副产物少，而且清洁无污染，是一条简单、快速、高效的生产途径，从发酵结果中可以看出，重组大肠杆菌KACCPG产量有着明显的提高。

公开(公告)号：CN112920984A

公开(公告)日：2021-06-08

申请号：CN202110162536.3

申请日：2021-02-05

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 王昕 ,  王静 ,  陈可泉 ,  廖杨 ,  朱强强 ,  王静雯 ,  吴怡菲 ,  欧阳平凯

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种构建基于甲酸和CO2生长的重组菌株的方法与应用。本发明通过将外源基因甲酸‑四氢叶酸连接酶（FtfL）、亚甲基四氢叶酸脱氢酶（MtdA）、甲基四氢叶酸环水解酶（Fch）表达在大肠杆菌工程菌株MG1655中，并且过表达甘氨酸裂解系统氨基甲基转移酶（GcvT）、甘氨酸裂解系统H蛋白（GcvH）、甘氨酸脱羧酶（GcvP），构建了能够高效利用底物甲酸及CO2生产的大肠杆菌。同时构建了甘氨酸营养缺陷型菌株验证其路径可行性。本发明首次实现了大肠杆菌利用底物甲酸及CO2生成甘氨酸从而生成丙酮酸进入三羧酸循环，实现生物量增长。