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公开(公告)号:CN103789261A
公开(公告)日:2014-05-14
申请号:CN201310616260.7
申请日:2013-11-26
Applicant: 南京大学医学院附属鼓楼医院
IPC: C12N5/0781
Abstract: 本发明涉及一种新型特异性抗原负载诱导CTL的活化B细胞模型。本发明分离人外周血,得人外周血单个核细胞,CD20磁珠分离其中的B细胞,将其在孵育箱内培养,去除B细胞的PBMC,B细胞培养后进行HBcAg18-27多肽负载,加入多肽量为50ug/ml,负载时间为12~18小时,抗原负载后洗涤B细胞,去除B细胞的PBMC细胞内,B细胞与T细胞比例为1:10,继续培养4天后取出所培养细胞,五聚体技术检测HBV?HBcAg18-27多肽特异性CTL细胞。本发明解决了占外周血单个核细胞的比例在1%以下、扩增的效率不高,且培养时间长并且培养的费用高昂等缺陷。本发明建立了一种可靠和简单的细胞实验模型,避免了树突状细胞需要长时间培养并培养扩增效率低下的缺陷。