公开(公告)号：CN104278050A

公开(公告)日：2015-01-14

申请号：CN201310286872.4

申请日：2013-07-10

Applicant: 南京大学

Inventor： 戚金亮 ,  杨永华 ,  方荣俊 ,  刘静 ,  赵胡 ,  赵华 ,  黄守程 ,  王小明 ,  杨荣武 ,  陆桂华

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了一个能高产药用天然产物(紫草宁及其衍生物)的硬紫草的转基因毛状根株系。该株系是通过构建一个硬紫草乙烯合成的关键酶基因(LeACS-1)的植物过表达载体，然后将该载体转入发根农杆菌ATCC15834后侵染硬紫草无菌苗而获得。该株系所产紫草宁及其衍生物的含量是直接用ATCC15834侵染硬紫草无菌苗所获得的毛状根株系的2.73倍。另外，该株系亦易于繁殖、生长迅速。本发明不仅可有效解决我国野外硬紫草资源日益短缺、人工栽培周期长、受气候及地理条件等因素制约等问题，并且可高效大量生产硬紫草药用天然产物。该高产株系将为利用硬紫草毛状根工厂化生产硬紫草药用天然产物提供材料支撑，具有广阔的开发应用前景。

公开(公告)号：CN104450772A

公开(公告)日：2015-03-25

申请号：CN201410657429.8

申请日：2014-11-18

Applicant: 南京大学

Inventor： 杨永华 ,  赵胡 ,  戚金亮 ,  吴凤瑶 ,  朱煜 ,  杨荣武 ,  庞延军

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种药用天然产物的硬紫草转基因毛状根株系及其制备方法。该株系首先通过克隆一个硬紫草中的关键转录因子基因(LeMYC)并构建其植物过表达载体，然后将该载体转入发根农杆菌ATCC15834后，侵染硬紫草的无菌苗而获得。该转基因株系所产紫草宁及其衍生物的含量是直接用ATCC15834侵染硬紫草无菌苗所获得的毛状根株系的3.37倍。同时，该株系易于繁殖、生长迅速。本发明不仅可有效解决我国野外硬紫草资源日益短缺、人工栽培周期长、受气候及地理条件等因素制约问题，并且可高效大量生产硬紫草药用天然产物。该高产株系将为利用硬紫草毛状根工厂化生产硬紫草药用天然产物提供材料支撑，具有广阔的开发应用前景。

公开(公告)号：CN104178510A

公开(公告)日：2014-12-03

申请号：CN201410366272.3

申请日：2014-07-28

Applicant: 南京大学

Inventor： 戚金亮 ,  杨永华 ,  赵胡 ,  方荣俊 ,  赵华 ,  韩秋敏 ,  朱煜 ,  吴凤瑶 ,  张东霞 ,  葛素囡 ,  王小明 ,  陆桂华 ,  杨荣武

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/06 ,  C12Q1/68 ,  C12P7/66

Abstract: 本发明公开了一个能高产紫草药用天然产物(紫草宁及其衍生物)的硬紫草转LeMYB1基因毛状根株系。该株系通过构建一个受茉莉酸甲酯高效诱导表达的关键转录因子基因LeMYB1的植物过表达载体，然后将该载体转入发根农杆菌ATCC15834后，侵染硬紫草的无菌苗而获得。该株系易于繁殖、生长迅速，所产紫草宁及其衍生物的含量是直接用ATCC15834侵染硬紫草无菌苗所获得的毛状根株系的2.88倍。本发明不仅可有效解决我国硬紫草资源的日益短缺、人工栽培周期长、受气候及地理条件制约等问题，并且可高效大量生产硬紫草药用天然产物。该高产株系将为利用硬紫草毛状根工厂化生产硬紫草药用天然产物提供材料支撑，具有广阔的开发应用前景。

公开(公告)号：CN101979603A

公开(公告)日：2011-02-23

申请号：CN201010536031.0

申请日：2010-11-09

Applicant: 南京大学

Inventor： 戚金亮 ,  赵胡 ,  夏红梅 ,  杨永华 ,  邹爱兰 ,  刘洪昌 ,  丁燕雯 ,  朱煜

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/06

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种采用发根农杆菌侵染紫草幼苗茎节诱导产生毛状根的方法，并用此毛状根生产药用次生代谢产物（如紫草宁及其衍生物等）。具体内容涉及紫草无菌苗的获得、发根农杆菌ATCC15834菌株的活化及侵染方法、毛状根除菌培养、毛状根的分子鉴定及大量繁殖、应用此毛状根在M9和RC培养基中大量生产药用次生代谢产物。本发明为紫草毛状根的产生提供了一种高效快速的诱导方法，并为利用此毛状根大量商业化生产药用次生代谢产物提供了一种新的途径。

公开(公告)号：CN104195167A

公开(公告)日：2014-12-10

申请号：CN201410366238.6

申请日：2014-07-28

Applicant: 南京大学

Inventor： 杨永华 ,  戚金亮 ,  方荣俊 ,  赵胡 ,  赵华 ,  刘静 ,  朱煜 ,  吴凤瑶 ,  王小明 ,  陆桂华 ,  杨荣武

IPC: C12N15/82 ,  A01H5/06

Abstract: 本发明公开了一个能高产紫草药用天然产物(紫草宁及其衍生物)的硬紫草的转基因毛状根株系。该株系通过构建一个硬紫草乙烯信号传导途径中的关键转录因子基因(LeEIL-1)的植物过表达载体，然后将该载体转入发根农杆菌ATCC15834后，侵染硬紫草的无菌苗而获得。该转基因株系所产紫草宁及其衍生物的含量是直接用ATCC15834侵染硬紫草无菌苗所获得的毛状根株系的2.81倍。同时，该株系易于繁殖、生长迅速。本发明不仅可有效解决我国野外硬紫草资源日益短缺、人工栽培周期长、受气候及地理条件等因素制约等问题，并且可高效大量生产硬紫草药用天然产物。该高产株系将为利用硬紫草毛状根工厂化生产硬紫草药用天然产物提供材料支撑，具有广阔的开发应用前景。