公开(公告)号：CN114592022A

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202210322009.9

申请日：2022-03-30

Applicant: 南京大学

Inventor： 于涵洋 ,  郭佳杰 ,  张泽

IPC: C12P19/34 ,  C12N15/113 ,  C12N15/115 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种基于DNA模板的长链TNA合成方法。该方法属于非天然核酸合成技术领域，具体步骤：获得DNA模板及对应引物；配置TNA引物延伸的反应体系；特定温度下进行以DNA为模板的TNA引物延伸反应；取小部分反应产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)实验，检验引物延伸反应是否成功进行；TNA产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验，分离模板DNA和TNA，切胶回收TNA。相比于固相合成，本发明可以有效地合成长达300nt的TNA，大幅提高了TNA合成的长度上限，并降低了合成的成本。为较长的TNA合成提供了优良的合成方式，支持了TNA在分子生物学中的研究和应用。

公开(公告)号：CN117802211A

公开(公告)日：2024-04-02

申请号：CN202410173257.0

申请日：2024-02-07

Applicant: 南京大学

Inventor： 于涵洋 ,  王月瑶 ,  张泽 ,  陈乐康

IPC: C12Q1/6869 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于链终止原理的自动化非天然核酸Sanger测序方法。本发明方法通过将DNA测序酶中的有益突变引入同源XNA逆转录酶的活性口袋，得到了可以同时高效兼容XNA待测序链和ddNTP的XNA测序工具酶(Bst F710Y)；相较于野生型，该XNA测序工具酶对ddNTP的表观一级延伸速率提升了两个数量级，达到了和天然dNTP相同的掺入速率；利用其作为XNA测序工具酶，建立XNA的Sanger测序方法，对XNA的连续测序长度突破了50个碱基；该XNA测序方法兼容BigDye修饰的ddNTP，测序产物可被DNA测序仪自动化分析读取。这一发明为未来功能性XNA的筛选和表征，以及基于XNA的数据存储系统的开发奠定了基础。