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公开(公告)号：CN114208676A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111625705.9
申请日：2021-12-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种的创制方法，以野生种西印度瓜为母本，栽培种‘新红瑞’为父本，进行人工杂交，包括：步骤1、取母本雌花与父本雄花进行授粉，授粉后喷施氯吡脲水溶液和噻苯隆溶液并套袋隔离；步骤2、取授粉后14～21d的幼嫩果实，先清洗表面，然后对果皮表面消毒，取出幼胚；步骤3、将幼胚置于培养基中进行黑暗培养，所述培养基为：MS+6‑BA+蔗糖+植物凝胶混合培养基；步骤4、所述黑暗培养的28～32d后转入继代培养基中继代培养，所述继代培养基为MS培养基，直接诱导幼胚分化成苗。本发明制得了甜瓜属野生种与栽培种部分种间杂种，解决了栽培甜瓜资源遗传基础狭窄，抗病抗逆能力弱的问题。
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公开(公告)号：CN108411024B
公开(公告)日：2020-08-25
申请号：CN201810345938.5
申请日：2018-04-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明首次公开了一个与黄瓜‑酸黄瓜渐渗系抗白粉病基因共分离的分子标记SNP6，属于植物分子育种领域，该标记正反向引物序列分别为：5′TTTCTTGTACAGGGGAAGGTGG 3′和5′TGTTTTGGTCAGGCAAAGGGT 3′。在感白粉病黄瓜品种‘长春密刺’与抗白粉病黄瓜‑酸黄瓜渐渗系‘IL52’构建的F2群体中，于SNP6位置处，在抗白粉病单株中可检测到纯合的C/C碱基，在感白粉病单株中可检测到纯合的T/T碱基或杂合的T/C碱基。本发明公开的分子标记SNP6可用于黄瓜‑酸黄瓜渐渗系抗白粉病基因精细定位和分子标记辅助育种，对于加快黄瓜白粉病抗性育种具有重要的理论和实践指导意义。
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公开(公告)号：CN110195125B
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN201910605499.1
申请日：2019-07-05
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11 , A01H1/02 , A01H1/04
Abstract: 本发明公开了黄瓜单性结实主效QTL Parth2.1的连锁分子标记及其应用。黄瓜单性结实主效QTL Parth2.1的连锁分子标记Indel‑16Y‑46，其上游引物:SEQ ID NO.1,下游引物:SEQ ID NO.2。本发明所述的分子标记在全雌强单性结实黄瓜新品种分子标记辅助育种中的应用。利用本发明分子标记对Parth2.1位点选择效率为100％。基于该分子标记开发了一种全雌强单性结实黄瓜新品种的分子标记辅助育种方法，获得的全雌强单性结实的黄瓜新品种是欧洲温室型黄瓜自交系品种，有较高的产量和优良的果实品质，可直接作为改良其他品种单性结实性和全雌性的骨干亲本。
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公开(公告)号：CN110438118A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910431970.X
申请日：2019-05-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种提取黄瓜线粒体及其DNA的有效方法，属于植物生物技术领域。以黄瓜黄化苗为材料，调整提取过程组织匀浆缓冲液成分和差速离心力组合，结合percoll密度梯度离心分离得到线粒体，并使用3％CTAB裂解线粒体，后续用氯仿-异戊醇抽提得到高质量mtDNA。用甘露醇和半胱氨酸取代传统方法的蔗糖和巯基乙醇配成的匀浆缓冲液A所提取线粒体完整性好，分离细胞破碎组织及纯化线粒体离心力分别为2000×g、17000×g时得到明显的线粒体聚层，纯化后mtDNA浓度为158ng·μL-1，每20g叶片可得7.9μg mtDNA。其中A260/A280约1.87，说明本方法提取分离得到的mtDNA纯度高。本发明首次建立一套适用于黄瓜mtDNA提取纯化的有效体系，对于其他物种构建mtDNA提取纯化体系具有参考意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106171963A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610747510.4
申请日：2016-08-25
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: A01H1/02 , A01H1/08 , C12Q1/6895 , C12Q2600/13 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明属于生物技术育种领域，涉及黄瓜抗蔓枯病渐渗系材料的培育方法。通过该材料获得黄瓜抗蔓枯病分子标记，专用于黄瓜抗蔓枯病分子辅助育种。本发明通过野生种与栽培种的种间杂交，染色体加倍后获得异源四倍体新种，经回交、自交，获得种间渐渗系。通过接种鉴定发现渐渗系HH1-8-1-2的病情指数为24.6，表现为抗病。抗蔓枯病基因QTL位点与标记SSR17406紧密连锁。本发明成功选育了黄瓜抗蔓枯病渐渗系材料，该材料农艺性状优良，可作为育种材料。通过本发明提供的黄瓜抗蔓枯病基因QTL位点的分子标记检测HH1-8-1-2的衍生品种(系)中是否含有该基因位点，可预测其抗性，提高选择效率，加速选育进程。
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公开(公告)号：CN104620976A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201310559624.2
申请日：2013-11-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一份甜瓜蔓枯病聚合抗源新种质及其选育的方法，属于植物生物技术育种领域。该聚合基因材料聚合了抗源PI420145和PI482398(Gsb-4)的抗蔓枯病基因，其抗性高于单一抗源，且农艺性状良好。选育方法是PI420145与PI482398杂交，所得F1连续自交三代，其中，每一代都采用表型鉴定和分子标记辅助选择相结合的方法进行筛选，选出同时聚合了两亲本抗性基因且抗性高于亲本的单株自交。并将与抗蔓枯病材料PI420145的抗性基因连锁的AFLP标记EcoRI-TG/MseI-CTC200转化为SCAR标记SGSB1800，能够迅速、简便的用于分子标记辅助选择。本发明获得的甜瓜抗蔓枯病聚合基因材料抗性高于单一抗源，且其鉴定方便，大大提高了甜瓜抗蔓枯病新品种的选择效率，提供了新抗源，也为进一步获得新的抗性品系奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104004849A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410257785.0
申请日：2014-06-09
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6841 , C12Q2543/10
Abstract: 本发明公开了利用黄瓜基因组原位杂交技术快速构建黄瓜中期染色体核型的方法，它是通过提取黄瓜基因组DNA，并将其标备探针。取黄瓜根尖进行酶解，火焰干燥法制片，获得分散度良好的中期染色体制片。将基因组DNA探针变性后杂交到变性的中期染色体制片上，利用高严谨度的杂交条件，使得染色体串联重复序列产生清晰可辨的荧光信号，从而构建黄瓜的中期染色体核型。本发明利用黄瓜基因组DNA作为探针，通过一次GISH快速构建黄瓜中期染色体核型，提高了试验效率。通过此方法，基于黄瓜基因组DNA探针在每条染色体上信号分布模式的不同，可快速构建出黄瓜中期染色体核型，为物种的核型分析研究提供了新的方法与参考。
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公开(公告)号：CN101785426B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010017672.5
申请日：2010-01-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及全雌华北型黄瓜华北全雌2号的培育及其应用，属于生物技术育种领域。将全雌型欧洲温室型黄瓜EC1与雌雄同株型华北型黄瓜P02杂交，所得F1与P02回交，在回交后代中选择全雌单株与雌雄同株型黄瓜亲本P02连续回交4代，选择BC4F1的全雌单株自交，在BC4F2中选择全雌单株继续自交，最后选择BC4F3均为全雌型植株的株系，把该株系黄瓜混合授粉，获得生长势强、优质高产的全雌华北型黄瓜新品种华北全雌2号。将华北全雌2号与普通栽培黄瓜杂交可获得种子纯度高且具有较强杂种优势的全雌型黄瓜品种。
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公开(公告)号：CN102199598A
公开(公告)日：2011-09-28
申请号：CN201110081073.4
申请日：2011-03-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于作物遗传育种与生物技术领域，涉及甜瓜抗蔓枯病基因Gsb-4的SSR标记。甜瓜资源PI482398抗蔓枯病基因Gsb-4的SSR标记，用SSR标记引物CMAT170a扩增含甜瓜资源PI482398抗蔓枯病基因Gsb-4的育种材料或品种DNA，获得的120bp扩增片段即为甜瓜资源PI482398抗蔓枯病基因Gsb-4的SSR标记，该SSR标记与抗性基因的遗传距离为5.14cM。本发明在国际上首次获得1个与甜瓜抗蔓枯病因Gsb-4紧密连锁的SSR分子标记。通过检测该分子标记，可以预测甜瓜植株的蔓枯病抗性，进而快速筛选抗病品种或品系用于甜瓜育种。抗病基因位点检测方便快速，不受环境条件限制。
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