一种提取黄瓜线粒体及其DNA的有效方法

    公开(公告)号:CN110438118B

    公开(公告)日:2022-07-05

    申请号:CN201910431970.X

    申请日:2019-05-22

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种提取黄瓜线粒体及其DNA的方法,属于植物生物技术领域。以黄瓜黄化苗为材料,调整提取过程组织匀浆缓冲液成分和差速离心力组合,结合percoll密度梯度离心分离得到线粒体,并使用3%CTAB裂解线粒体,后续用氯仿‑异戊醇抽提得到高质量mtDNA。最终所提取线粒体完整性好,纯化后mtDNA浓度为158ng·μL‑1,每20g叶片可得7.9μg mtDNA。其中A260/A280约1.87,说明本方法提取分离得到的mtDNA纯度高。本发明首次建立一套适用于黄瓜mtDNA提取纯化的有效体系,对于其他物种构建mtDNA提取纯化体系具有参考意义。

    一种种间杂交改良栽培黄瓜霜霉病抗性的育种方法

    公开(公告)号:CN117546773A

    公开(公告)日:2024-02-13

    申请号:CN202311389380.8

    申请日:2023-10-25

    摘要: 本发明公开了一种种间杂交改良栽培黄瓜霜霉病抗性的育种方法,涉及黄瓜抗病育种技术领域,其技术方案要点是:包括人工授粉,授粉后,对果梗喷施坐果灵和对幼嫩子房喷TDZ激素,并挂牌标记;消毒取种:取授粉后成熟果实,先清洗表面,对其表面消毒,消毒后将种子取出、催芽种植:将获得的种子浸泡在水中,数个小时后将种子转移至盛有清水的容器中,置于光照培养箱中进行催芽,期间每天定时换水,出芽后进行田间常规种植管理等步骤。本发明具有克服黄瓜种间杂交障碍,通过进行霜霉病抗性的田间鉴定,利用重茬地块统计霜霉病自然发病情况,发现种间杂交后代的霜霉病抗性增强以及扩充栽培黄瓜资源遗传基础等效果。

    黄瓜单性结实主效QTL Parth2.1的连锁分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN110195125B

    公开(公告)日:2020-04-07

    申请号:CN201910605499.1

    申请日:2019-07-05

    摘要: 本发明公开了黄瓜单性结实主效QTL Parth2.1的连锁分子标记及其应用。黄瓜单性结实主效QTL Parth2.1的连锁分子标记Indel‑16Y‑46,其上游引物:SEQ ID NO.1,下游引物:SEQ ID NO.2。本发明所述的分子标记在全雌强单性结实黄瓜新品种分子标记辅助育种中的应用。利用本发明分子标记对Parth2.1位点选择效率为100%。基于该分子标记开发了一种全雌强单性结实黄瓜新品种的分子标记辅助育种方法,获得的全雌强单性结实的黄瓜新品种是欧洲温室型黄瓜自交系品种,有较高的产量和优良的果实品质,可直接作为改良其他品种单性结实性和全雌性的骨干亲本。

    一种提取黄瓜线粒体及其DNA的有效方法

    公开(公告)号:CN110438118A

    公开(公告)日:2019-11-12

    申请号:CN201910431970.X

    申请日:2019-05-22

    IPC分类号: C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种提取黄瓜线粒体及其DNA的有效方法,属于植物生物技术领域。以黄瓜黄化苗为材料,调整提取过程组织匀浆缓冲液成分和差速离心力组合,结合percoll密度梯度离心分离得到线粒体,并使用3%CTAB裂解线粒体,后续用氯仿-异戊醇抽提得到高质量mtDNA。用甘露醇和半胱氨酸取代传统方法的蔗糖和巯基乙醇配成的匀浆缓冲液A所提取线粒体完整性好,分离细胞破碎组织及纯化线粒体离心力分别为2000×g、17000×g时得到明显的线粒体聚层,纯化后mtDNA浓度为158ng·μL-1,每20g叶片可得7.9μg mtDNA。其中A260/A280约1.87,说明本方法提取分离得到的mtDNA纯度高。本发明首次建立一套适用于黄瓜mtDNA提取纯化的有效体系,对于其他物种构建mtDNA提取纯化体系具有参考意义。

    黄瓜单性结实主效QTL Parth2.1的连锁分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN110195125A

    公开(公告)日:2019-09-03

    申请号:CN201910605499.1

    申请日:2019-07-05

    摘要: 本发明公开了黄瓜单性结实主效QTL Parth2.1的连锁分子标记及其应用。黄瓜单性结实主效QTL Parth2.1的连锁分子标记Indel-16Y-46,其上游引物:SEQ ID NO.1,下游引物:SEQ ID NO.2。本发明所述的分子标记在全雌强单性结实黄瓜新品种分子标记辅助育种中的应用。利用本发明分子标记对Parth2.1位点选择效率为100%。基于该分子标记开发了一种全雌强单性结实黄瓜新品种的分子标记辅助育种方法,获得的全雌强单性结实的黄瓜新品种是欧洲温室型黄瓜自交系品种,有较高的产量和优良的果实品质,可直接作为改良其他品种单性结实性和全雌性的骨干亲本。