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公开(公告)号：CN116179735A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202210549115.0
申请日：2022-05-20
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12N15/11
摘要： 本发明公开一种用于币斑病菌检测和物种鉴别的多重PCR反应体系的构建方法及其应用。本发明方法包括：获得币斑病菌多个物种全基因组序列，并进行多序列比对，获得各物种特有基因及特有基因簇；以各物种特有基因簇内基因为模板，按照常规引物设计方法设计出多个上游引物和下游引物，产生引物对，排除不合理的及敏感性和特异性较低的引物对。根据扩增产物大小，将引物自由组合搭配，产生四对引物混合的多重引物，优化多重PCR反应条件获得能够特异性检测币斑病菌并同时鉴别单个及多个物种的多重PCR体系。本发明提供的用于币斑病菌检测和物种鉴别的多重PCR方法，可以快速、准确的完成币斑病菌的检测并鉴别币斑病菌物种身份。
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公开(公告)号：CN115039589A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210639218.6
申请日：2022-06-08
申请人： 南京农业大学 , 句容市南农大草坪研究院
摘要： 本发明提供了一种氟喹沙星提高草坪草耐湿热性能的应用，属于植物抗逆调控技术领域。本发明提供的利用氟喹沙星提高草坪草耐湿热性能的方法，包括如下步骤：(1)将氟喹沙星用水配置成母液；(2)将所述母液用水稀释后加入助剂，得到氟喹沙星药液；(3)将所述氟喹沙星药液于高温高湿季来临前20天开始喷施，每7～10天喷施1次，喷施次数不少于3次。本发明利用氟喹沙星可以显著缓解草坪草在夏季高温高湿季节的草坪质量下降，和空白对照相比，表现为色泽更绿，密度更大，均一性更好，病虫害更少，死枯率更低，且具有环境友好、无残留、配方简单、使用方便的特点。
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公开(公告)号：CN105624049B
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201610170501.3
申请日：2016-03-23
申请人： 南京农业大学
摘要： 本发明公开了一种草坪币斑病菌的分离方法，包括如下步骤：病样采集：切取具有典型币斑病症状的病健交接处植株及土壤样本作为病样；病样保湿培养；病原菌分离：使用接种针挑取在病样表面长出的细丝状菌丝，置于APDA培养基上，22‑25℃黑暗条件培养2d；病原菌纯化：待气生菌丝长出后，切取菌落边缘的菌丝尖端，转入新的APDA培养基上，22‑25℃黑暗条件培养3‑5d，得到目的病原菌。本发明通过对病样进行保湿培养前处理，并结合酸化PDA培养基的使用，可解决币斑病菌分离过程中各种非目标真菌污染的问题，且操作简单，整个过程无需严格的消毒杀菌操作。与传统币斑病菌分离方法相比，分离效率及成功率显著提高。
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公开(公告)号：CN118979120A
公开(公告)日：2024-11-19
申请号：CN202411293970.5
申请日：2024-09-14
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/645
摘要： 本发明公开一种快速定量检测海雀稗稀疏斑病菌的探针qPCR检测方法及其应用。本发明基于Taqman探针，通过比较海雀稗稀疏斑病菌及其近似种之间的ITS序列差异，设计了一对特异性引物(MPITSF和MPITSR)和一条特异性探针(MPITSP)。通过定量反应过程中荧光信号的变化，能从各种常见引起草坪病害的病原物中区分出致病性海雀稗稀疏斑病菌。本方法具有操作简单，快速(1h)，准确，灵敏度高等优势，适用于田间和实验室开展海雀稗稀疏斑病菌的快速检测和鉴定。
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公开(公告)号：CN106591286A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611004305.5
申请日：2016-11-15
申请人： 南京农业大学
CPC分类号： C12N15/1003 , C12N1/14
摘要： 本发明公开了一种提高草坪币斑病菌DNA提取质量的方法，包括如下步骤：培养皿中加入含有抗生素的MM培养基，在培养基表面铺上灭菌玻璃纸，挑取菌丝转移至培养基中间，25‑30℃黑暗条件培养7‑14d；刮取玻璃纸表面菌丝20‑50mg置于离心管中，通风干燥，往离心管中加入钢珠，液氮冷冻、磨碎菌丝；采用经典CTAB法提取得到基因组DNA，将基因组DNA溶解于TE缓冲液，静置24‑48h，离心，去除不溶于TE缓冲液的杂质。本发明通过使用MM培养基降低币斑病菌菌丝组织中的多糖含量，从而提高病原菌基因组DNA的提取质量，无需昂贵的仪器设备或DNA提取试剂盒，DNA提取质量显著提高、稳定性好且经济高效。
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公开(公告)号：CN112813766A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202110022021.3
申请日：2021-01-08
申请人： 南京农业大学 , 句容市南农大草坪研究院
摘要： 本发明公开了一种天然人造混合草皮，由下往上依次包括基底层、保护层、基质层和草茎层；所述保护层为人造草皮；所述基质层包括硅酸盐矿物颗粒和有机肥；所述草茎层的草茎包括天然草坪草的根茎和匍匐茎。本发明的混合草皮结合了天然草和人造草的优点,既满足草皮对于强度的需求,同时能实现环境友好,缓冲能力较强。
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公开(公告)号：CN117126929A
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202210549114.6
申请日：2022-05-20
申请人： 南京农业大学
IPC分类号： C12Q1/6869 , C12Q1/689 , C12Q1/6895
摘要： 本发明公开了一种草坪病害高通量精准诊断方法的建立，首先采集样品，接着进行微生物组测序，最后根据测序结果的丰度进行分析。本发明去除繁琐的病原菌分离鉴定中间步骤，引入病组织微生物组测序技术。将整套流程从14天缩短至两到三天，并且可以根据测序结果的丰度分析出多个病害。
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公开(公告)号：CN106591286B
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201611004305.5
申请日：2016-11-15
申请人： 南京农业大学
摘要： 本发明公开了一种提高草坪币斑病菌DNA提取质量的方法，包括如下步骤：培养皿中加入含有抗生素的MM培养基，在培养基表面铺上灭菌玻璃纸，挑取菌丝转移至培养基中间，25‑30℃黑暗条件培养7‑14d；刮取玻璃纸表面菌丝20‑50mg置于离心管中，通风干燥，往离心管中加入钢珠，液氮冷冻、磨碎菌丝；采用经典CTAB法提取得到基因组DNA，将基因组DNA溶解于TE缓冲液，静置24‑48h，离心，去除不溶于TE缓冲液的杂质。本发明通过使用MM培养基降低币斑病菌菌丝组织中的多糖含量，从而提高病原菌基因组DNA的提取质量，无需昂贵的仪器设备或DNA提取试剂盒，DNA提取质量显著提高、稳定性好且经济高效。
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公开(公告)号：CN105624049A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201610170501.3
申请日：2016-03-23
申请人： 南京农业大学
摘要： 本发明公开了一种草坪币斑病菌的分离方法，包括如下步骤：病样采集：切取具有典型币斑病症状的病健交接处植株及土壤样本作为病样；病样保湿培养；病原菌分离：使用接种针挑取在病样表面长出的细丝状菌丝，置于APDA培养基上，22-25℃黑暗条件培养2d；病原菌纯化：待气生菌丝长出后，切取菌落边缘的菌丝尖端，转入新的APDA培养基上，22-25℃黑暗条件培养3-5d，得到目的病原菌。本发明通过对病样进行保湿培养前处理，并结合酸化PDA培养基的使用，可解决币斑病菌分离过程中各种非目标真菌污染的问题，且操作简单，整个过程无需严格的消毒杀菌操作。与传统币斑病菌分离方法相比，分离效率及成功率显著提高。
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