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公开(公告)号:CN101845441A
公开(公告)日:2010-09-29
申请号:CN201010125057.6
申请日:2010-03-16
申请人: 南京农业大学
摘要: 本发明涉及一种复合猪α干扰素基因及其重组载体,属于基因工程生物制品技术领域。将新设计的复合猪α干扰素的基因序列重组到pPICZα-A载体,电转化入酵母菌感受态细胞,阳性鉴定、高拷贝酵母菌株的筛选、诱导表达。采用毕赤酵母表达系统表达外源基因,有利于猪干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白与酵母表达的天然干扰素相比,其表达量提高3.17倍。荧光定量PCR结果显示,用10-6mg/ml该复合猪α干扰素预处理的PK-15细胞再感染PRV,其PRVmRNA水平明显低于没经过复合猪α干扰素处理的PK-15细胞感染PRV后的PRVmRNA的水平,其PRVmRNA水平降低了37倍。
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公开(公告)号:CN101338314B
公开(公告)日:2010-06-02
申请号:CN200810123997.4
申请日:2008-06-16
申请人: 南京农业大学
摘要: 本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列,并构建其重组表达载体,属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到pPICZα-A载体,然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因,有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过4365158.3倍稀释后,能完全抑制100-1000TCID50的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比,有更强的抗病毒作用,其抗病毒作用提高了6.8倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖,且高浓度的干扰素作用更明显。
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公开(公告)号:CN101845441B
公开(公告)日:2011-10-12
申请号:CN201010125057.6
申请日:2010-03-16
申请人: 南京农业大学
摘要: 本发明涉及一种复合猪α干扰素基因及其重组载体,属于基因工程生物制品技术领域。将新设计的复合猪α干扰素的基因序列重组到pPICZα-A载体,电转化入酵母菌感受态细胞,阳性鉴定、高拷贝酵母菌株的筛选、诱导表达。采用毕赤酵母表达系统表达外源基因,有利于猪干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白与酵母表达的天然干扰素相比,其表达量提高3.17倍。荧光定量PCR结果显示,用10-6mg/ml该复合猪α干扰素预处理的PK-15细胞再感染PRV,其PRVmRNA水平明显低于没经过复合猪α干扰素处理的PK-15细胞感染PRV后的PRVmRNA的水平,其PRVmRNA水平降低了37倍。
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公开(公告)号:CN102002499A
公开(公告)日:2011-04-06
申请号:CN201010507298.7
申请日:2010-10-14
申请人: 南京农业大学
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61P31/14
摘要: 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种能抑制乙型脑炎病毒复制与感染的shRNA及其应用。该shRNA以乙型脑炎病毒基因组中高度保守的序列作为其靶序列,所述的靶序列为:SEQIDNO.9、SEQIDNO.10、SEQIDNO.11或SEQIDNO.12。该shRNA真核表达质粒是将所述的shRNA的模板与线性化的载体pGPU6/GFP/Neo连接得到分别针对乙型脑炎病毒E、NS3或NS4b基因mRNA序列的shRNA真核表达质粒。本发明所提供的shRNA以及shRNA真核表达质粒能够在制备治疗和/或预防JEV感染的药物中应用,为治疗和预防JEV感染提供一种新的可选药物。
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公开(公告)号:CN101338314A
公开(公告)日:2009-01-07
申请号:CN200810123997.4
申请日:2008-06-16
申请人: 南京农业大学
摘要: 本发明涉及一种新型重组鸡α干扰素基因序列,并构建其重组表达载体,属于用分子生物学方法获得的基因工程生物制品。将新设计的鸡α干扰素的基因序列重组到pPICZα-A载体,然后通过电转化方式整合到酵母菌上的特定位置。并采用毕赤酵母表达系统表达外源基因,有利于鸡干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白经过4365158.3倍稀释后,能完全抑制100-1000TCID50的水疱性口炎病毒的攻击。与天然的鸡α干扰素相比,有更强的抗病毒作用,其抗病毒作用提高了6.8倍。试验还测定该基因表达的蛋白可抑制新城疫病毒和禽流感病毒的增殖,且高浓度的干扰素作用更明显。
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公开(公告)号:CN102382831B
公开(公告)日:2012-10-17
申请号:CN201110359813.6
申请日:2010-10-14
申请人: 南京农业大学
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61P31/14
摘要: 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种能抑制乙型脑炎病毒复制与感染的shRNA及其应用。该shRNA以乙型脑炎病毒基因组中高度保守的序列作为其靶序列,所述的靶序列为:SEQ ID NO.10。该shRNA真核表达质粒是将所述的shRNA的模板与线性化的载体pGPU6/GFP/Neo连接得到分别针对乙型脑炎病毒E基因mRNA序列的shRNA真核表达质粒。本发明所提供的shRNA真核表达质粒能够在制备治疗和/或预防JEV感染的药物中应用,为治疗和预防JEV感染提供一种新的可选药物。
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公开(公告)号:CN102382831A
公开(公告)日:2012-03-21
申请号:CN201110359813.6
申请日:2010-10-14
申请人: 南京农业大学
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61P31/14
摘要: 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种能抑制乙型脑炎病毒复制与感染的shRNA及其应用。该shRNA以乙型脑炎病毒基因组中高度保守的序列作为其靶序列,所述的靶序列为:SEQ ID NO.10。该shRNA真核表达质粒是将所述的shRNA的模板与线性化的载体pGPU6/GFP/Neo连接得到分别针对乙型脑炎病毒E基因mRNA序列的shRNA真核表达质粒。本发明所提供的shRNA真核表达质粒能够在制备治疗和/或预防JEV感染的药物中应用,为治疗和预防JEV感染提供一种新的可选药物。
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公开(公告)号:CN102002499B
公开(公告)日:2012-06-20
申请号:CN201010507298.7
申请日:2010-10-14
申请人: 南京农业大学
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K48/00 , A61P31/14
摘要: 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种能抑制乙型脑炎病毒复制与感染的shRNA及其应用。该shRNA以乙型脑炎病毒基因组中高度保守的序列作为其靶序列,所述的靶序列为:SEQIDNO.9、SEQIDNO.10、SEQIDNO.11或SEQIDNO.12。该shRNA真核表达质粒是将所述的shRNA的模板与线性化的载体pGPU6/GFP/Neo连接得到分别针对乙型脑炎病毒E、NS3或NS4b基因mRNA序列的shRNA真核表达质粒。本发明所提供的shRNA以及shRNA真核表达质粒能够在制备治疗和/或预防JEV感染的药物中应用,为治疗和预防JEV感染提供一种新的可选药物。
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