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公开(公告)号：CN103472182B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310385454.0
申请日：2013-08-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N30/89
Abstract: 本发明公开了一种鉴定菊花远缘杂交胚胎败育相关蛋白的方法，属于菊花育种与蛋白质组学领域。该方法包括：以栽培小菊作母本，野菊菊花脑作父本开展远缘杂交工作。授粉后不同时间剪下已授粉的花序，分别取形态发育完整、饱满的子房和形态发育异常、不饱满的子房，取样后立即在液氮中速冻后保存于-80℃冰箱中。样品用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质，保存于-80℃。最后运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白，并进行生物信息学分析，获得与菊花远缘杂交育种中胚胎败育的相关蛋白。本发明针对菊花及其近缘属野生种，提供了一种快速、准确鉴定菊花胚胎发育过程中不同发育阶段的不同形态的胚胎差异蛋白，为解决菊花远缘杂交胚胎败育提供研究基础。
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公开(公告)号：CN102860222A
公开(公告)日：2013-01-09
申请号：CN201210259784.0
申请日：2012-07-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01G7/00
Abstract: 本发明公开了一种通过叶型特征鉴定菊花品种的方法，属于菊花品种资源鉴别与品种权保护领域，该方法包括：测定菊花植株不同叶位的叶型指标，确定植株叶型保守的叶位；采集菊花品种不同单株间保守的叶位的叶型指标，并将该叶型指标在不同品种间作差异显著性分析，确定在不同品种间存在显著性差异的叶型指标为特异性叶型特征指标；将多个特异性叶型特征指标通过多元判别分析法进行品种判定。本发明鉴定方法通过对品种成熟叶片特征的测定，综合品种的叶型特征指标进行类别（品种）判定，检测成本低廉，易实施，特异性强，准确度高。
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公开(公告)号：CN102154320A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201110039094.X
申请日：2011-02-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 菊花抗逆转录因子DgZFP1及其植物表达载体和构建方法及应用，本发明属于分子生物学领域。本发明所构建的表达载体pCAMBIA1301-DgZFP1是由DgZFP1基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector(Takara)，经BamHI (Takara)和KpnI (Takara)双酶切后连接到载体pCAMBIA1301(Invitrogen)的BamHI和KpnI位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，DgZFP1基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成DgZFP1蛋白，调控下游基因的表达，提高植物耐盐性。
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公开(公告)号：CN102154316A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201110030101.X
申请日：2011-01-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了睡莲花器官发育基因NsAGL6及其植物表达载体和构建方法。睡莲花器官发育基因NsAGL6，序列为SEQ ID NO.1，本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-220-NsAGL6是由NsAGL6基因连接到线性化的pCAMBIA 1301-220质粒而得到的。将该植物表达载体用于植物遗传转化，NsAGL6基因在CaMV35S启动子的驱动下超量表达，大量合成AGL6蛋白，调控下游基因的表达，使之提前开花，改变植物花型。
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公开(公告)号：CN101006774A
公开(公告)日：2007-08-01
申请号：CN200710019346.6
申请日：2007-01-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及通过减少培养基中大量元素进行菊花离体保存的方法，专用于菊花种质资源离体保存。取菊花脚芽为外植体，以腋芽进行继代增殖。在1/2MS或1/2MS(1/2NH4+)或1/4MS，附加6－BA0.3mg/L和NAA0.1mg/L的培养基上进行保存，12个月后存活率均为100％，比正常MS培养基上的试管苗延长存活8个月。保存材料恢复生长正常，其后代经过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶、ISSR分子标记检测未发生遗传变异。本发明首次利用减少培养基中大量元素保存菊花试管苗并对其后代进行遗传稳定性鉴定，不但保存1年后植株生长正常，而且保存材料的后代未发生遗传性变异。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101002541A
公开(公告)日：2007-07-25
申请号：CN200710019345.1
申请日：2007-01-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种菊花种质资源离体保存的方法，专用于菊花种质资源离体保存。取菊花脚芽为外植体，以腋芽进行继代增殖。在分别附加了20～40mg·L－1脱落酸(ABA)的MS＋0.3mg·L－16－BA＋0.1mg·L－1NAA培养基中进行保存，10个月后存活率均为100％，比正常培养基上生长的试管苗延长存活6个月。保存材料恢复生长正常，其后代经过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶、ISSR分子标记检测未发生遗传变异。本发明首次利用在培养基中添加脱落酸保存菊花试管苗并对其后代进行遗传稳定性鉴定，不但保存10个月后植株生长正常，而且保存材料的后代未发生遗传性变异。
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公开(公告)号：CN102660557B
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201210171527.1
申请日：2012-05-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了菊花水孔蛋白编码基因CmAQP及其植物表达载体和构建方法。本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-CmAQP是由CmAQP基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector，经BamH I和Xba I双酶切后连接到载体pCAMBIA 1301的BamH I和Xba I位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，CmAQP基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成CmAQP蛋白，从而提高拟南芥种子盐胁迫下的萌发率。
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公开(公告)号：CN102174567B
公开(公告)日：2012-11-28
申请号：CN201110049075.5
申请日：2011-03-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程和转基因育种领域，涉及一种通过转DdICE1基因提高菊花抗逆性的方法，包括以下步骤：构建DdICE1基因植物表达载体；采用农杆菌介导法将其转入菊花中，进行培养初步获得抗性植株。对转化植株进行PCR、半定量及定量RT-PCR检测证实外源基因已经转入转基因植株的基因组DNA中并发生转录。对转基因植株进行抗性检测，发现与未转基因植株相比，转基因植株抗寒、抗旱和抗盐性有很大提高。本发明通过转化外源DdICE1转录因子并正常转录表达，及在逆境下诱导下游一系列抗逆基因的表达从而提高切花菊的抗逆性，为利用基因工程技术选育菊花抗逆品种提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号：CN102660557A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210171527.1
申请日：2012-05-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了菊花水孔蛋白编码基因CmAQP及其植物表达载体和构建方法。本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-CmAQP是由CmAQP基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector，经BamH I和Xba I双酶切后连接到载体pCAMBIA 1301的BamH I和Xba I位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，CmAQP基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成CmAQP蛋白，从而提高拟南芥种子盐胁迫下的萌发率。
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