一种快速驯化贴壁细胞为全悬浮细胞系的方法

    公开(公告)号:CN108865967A

    公开(公告)日:2018-11-23

    申请号:CN201710330836.1

    申请日:2017-05-11

    CPC classification number: C12N5/0018 C12N2500/32

    Abstract: 本发明公开了一种快速驯化贴壁细胞成为全悬浮细胞系的方法,将低传代健康贴壁细胞直接接种到无血清、无微载体培养基的转瓶中驯化培养;当细胞适应了大于6rpm转瓶机的转速,转到摇瓶中,用新鲜培养基将细胞起始密度调整至5x105细胞/mL,摇瓶转速调整为10‑40rpm;如果4‑5天后细胞密度增长达不到1x106细胞/mL,将细胞离心沉淀后用新鲜无血清、无微载体培养基将细胞密度调整在5x105细胞/mL后继续驯化培养,反复这一驯化步骤直到细胞密度在4‑6天后≥10倍增长,经过10代以上摇瓶传代驯化培养,即可获得全悬浮细胞系,该方法简便,快速,重复性好,成功率高,全悬浮细胞系稳定并且对病毒的感染性不变。

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