公开(公告)号：CN104673819A

公开(公告)日：2015-06-03

申请号：CN201510070716.3

申请日：2015-02-10

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 刘冬梅 ,  费永涛 ,  黄娟 ,  陈思敏 ,  黄智斌

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/53 ,  C12R1/25

Abstract: 本发明公开了一种用于敲除L-乳酸脱氢酶1基因的载体及构建方法，该方法为将不含L-乳酸脱氢酶编码基因的该基因的上下游DNA片段利用重叠延伸法完成拼接并将此拼接片段克隆到亚载体pMD18-T上，并转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中，通过蓝白斑筛选构建好的亚克隆载体，双酶切得到目的条带后连接到pG+host9质粒上，经过菌落PCR以及双酶切鉴定成功得到重组载体。本发明通过重叠延伸PCR的方法来构建敲除L-乳酸脱氢酶编码基因的重组质粒，避免了酶切连接引入多余的碱基序列。本发明重组载体可用于生产高光学纯度的D-乳酸。

公开(公告)号：CN105063066A

公开(公告)日：2015-11-18

申请号：CN201510487484.1

申请日：2015-08-10

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 刘冬梅 ,  罗彤晖 ,  杨丹霞 ,  陈舒然 ,  黄智斌

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/06 ,  C12N15/70 ,  A23L1/015 ,  C02F3/34 ,  C02F101/16

Abstract: 本发明公开了一种蜡样芽孢杆菌亚硝酸盐还原酶及基因和应用，本发明是利用PCR技术将蜡样芽孢杆菌LJ01中的亚硝酸盐还原酶(简称NiR)基因进行克隆并在大肠杆菌中进行了诱导表达，通过对加IPTG诱导含空质粒BL21、不加IPTG诱导含重组质粒BL21以及加IPTG诱导含重组质粒BL21的细胞进行超声破碎提取粗酶液，对其进行SDS-PAGE检测重组蛋白的表达，利用亲和层析作用纯化得到高纯度的重组蛋白，解决了从蜡样芽孢杆菌中分离出纯度和含量较高NiR的难题。得到的大量的NiR重组蛋白可以用于食品中的亚硝酸盐的降解；也可用于非酸性环境中亚硝酸盐的降解及养殖水体中亚硝酸盐的降解。

公开(公告)号：CN105077113A

公开(公告)日：2015-11-25

申请号：CN201510493977.6

申请日：2015-08-12

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 刘冬梅 ,  黄娟 ,  郭均 ,  杨丹霞 ,  黄智斌 ,  韩欣 ,  杨慧宁 ,  吴晖

IPC: A23L1/218 ,  A23L1/03 ,  A23L1/302

CPC classification number: A23V2002/00 ,  A23Y2220/17 ,  A23V2250/708

Abstract: 本发明公开了一种含混合乳酸菌的泡菜及制备方法，其中混合乳酸菌包括乳杆菌(Lactobacillus sp.)DMDL 9010和干酪乳杆菌鼠李糖亚种(Lactobacillus casei subsp.Rhamnosus)，所述乳杆菌已于2011年8月19日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.5172。将新鲜蔬菜加入混合乳酸菌在20～40℃厌氧发酵60～72h后，在常温下放置6个月所得泡菜中乳酸菌活菌数可达到105～106cfu/g，食盐含量低于3.0％。本发明的发酵泡菜几乎不含亚硝酸盐，生产周期短，产品质量稳定，含有活的益生菌，可即食。