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公开(公告)号:CN119685280A
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202510205986.4
申请日:2025-02-25
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种L‑氨基酸脱氨酶及其突变体与应用。本发明首次验证了豪氏变形杆菌来源的L‑氨基酸脱氨酶具有催化L‑谷氨酸生成α‑KG的能力。通过蛋白三维结构模拟等预测出可能影响催化和结合的相关位点为I64、G257、Q278、M440,进行定点饱和突变,获得高效催化合成α‑KG的突变体及工程菌。与野生型相比,突变体LAAD‑phRK催化生成α‑KG的产率提高了4.53倍。1.5 g/L LAAD‑phRK全细胞于10 mM L‑谷氨酸、10 mM钙离子的反应体系中,于30℃、pH8.0下反应8 h,能转化6 mM以上的L‑谷氨酸,α‑KG的摩尔产率在60%以上,具有大规模工业应用的广泛前景。