公开(公告)号：CN114395523A

公开(公告)日：2022-04-26

申请号：CN202111599405.8

申请日：2021-12-24

申请人： 华南理工大学

发明人： 段玉友 ,  唐湘莲 ,  吴海滨 ,  陈洪林

IPC分类号： C12N5/071 ,  C12N5/0735

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种诱导干细胞分化为肝细胞的试剂盒及其应用。该试剂盒包含：第一培养基和第二培养基；所述第一培养基为含有GSK3β抑制剂的基础培养基；所述第二培养基为含有Activin A的基础培养基；所述GSK3β抑制剂在所述第一培养基中的终浓度为6～12μM；所述Activin A在所述第二培养基中的终浓度为1～10ng/mL，不包含10ng/mL。该试剂盒通过小分子化合物GSK3β抑制剂以及低浓度的生长因子Activin A的组合搭配，替换高浓度且昂贵的生长因子Activin A和Wnt3a，在降低成本的同时，可以提高内胚层分化效率、肝细胞的功能、成熟度和质量。

公开(公告)号：CN116042508A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202211696116.4

申请日：2022-12-28

申请人： 华南理工大学

发明人： 段玉友 ,  汪怡玙 ,  吴海滨 ,  陈洪林

IPC分类号： C12N5/071 ,  C12N5/0735 ,  C12N5/0775 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开了一种诱导多能干细胞分化为肝细胞的试剂盒、方法及其应用。试剂盒中包含低浓度的白藜芦醇，本发明首次发现添加低浓度白藜芦醇诱导所得肝细胞的白蛋白分泌量，药物代谢酶基因表达水平以及极化基因等肝功能相关基因表达水平都显著升高，并且可以减少高浓度且昂贵的生长因子的使用，进一步促进人多功能干细胞的肝向分化；通过采用本发明提供的试剂盒建立了一条由人多功能干细胞3D悬浮定向分化为肝细胞的方法；大大加快了干细胞的肝分化进程，同时也降低了分化成本，提高肝细胞的成熟度和药物代谢能力，更加高效简便。

公开(公告)号：CN110872572A

公开(公告)日：2020-03-10

申请号：CN201911189173.1

申请日：2019-11-27

申请人： 华南理工大学

发明人： 段玉友 ,  唐湘莲 ,  吴海滨 ,  陈洪林

IPC分类号： C12N5/0735 ,  C12N5/074 ,  C12N5/02

摘要： 本发明属于细胞培养的技术领域，公开了一种提高人多功能干细胞体外悬浮培养的效率的方法。所述提高人多功能干细胞体外悬浮培养效率的方法：将人多功能干细胞用含聚乙烯醇或葡聚糖硫酸酯与聚乙烯醇的培养基进行三维培养；所述葡聚糖硫酸酯在培养基中的浓度为10～100ug/ml；所述聚乙烯醇在培养基中的浓度为0.1～1mg/ml。本发明的方法不仅能够减少细胞聚集体的大小且得到尺寸均一的聚集体，还能达到较高的细胞数量以满足体外扩增人多功能干细胞的需求，提高了人多功能干细胞的培养效率。

公开(公告)号：CN114395523B

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202111599405.8

申请日：2021-12-24

申请人： 华南理工大学

发明人： 段玉友 ,  唐湘莲 ,  吴海滨 ,  陈洪林

IPC分类号： C12N5/071 ,  C12N5/0735

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种诱导干细胞分化为肝细胞的试剂盒及其应用。该试剂盒包含：第一培养基和第二培养基；所述第一培养基为含有GSK3β抑制剂的基础培养基；所述第二培养基为含有Activin A的基础培养基；所述GSK3β抑制剂在所述第一培养基中的终浓度为6～12μM；所述Activin A在所述第二培养基中的终浓度为1～10ng/mL，不包含10ng/mL。该试剂盒通过小分子化合物GSK3β抑制剂以及低浓度的生长因子Activin A的组合搭配，替换高浓度且昂贵的生长因子Activin A和Wnt3a，在降低成本的同时，可以提高内胚层分化效率、肝细胞的功能、成熟度和质量。

公开(公告)号：CN115851578A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202211668145.X

申请日：2022-12-23

申请人： 华南理工大学

发明人： 段玉友 ,  吴海滨 ,  陈洪林

IPC分类号： C12N5/071 ,  C12N5/074 ,  C12Q1/02

摘要： 本发明公开了一种3D悬浮诱导持续扩增肝祖细胞类器官和/或肝细胞类器官的试剂盒及其应用。试剂盒中减少了细胞因子种类及其用量，使用低浓度的Matrigel分化培养类器官，更高效的支持肝祖细胞类器官和/或肝细胞类器官的长期维持和扩增。在Matrigel存在的条件下，成熟肝细胞类器官中肝细胞呈极化状态，类似于体内肝组织结果，从结构上明显不同于3D悬浮培养条件下非极化的肝细胞球。使用本发明的试剂盒可消耗更少的培养基和细胞因子以及缩短了分化时间，实现体外类器官大规模化扩增培养，从细胞产量、功能及成本等方面可满足临床治疗、药物筛选研发以及药物毒理分析等领域对功能性肝细胞的需求。

公开(公告)号：CN115851578B

公开(公告)日：2023-11-21

申请号：CN202211668145.X

申请日：2022-12-23

申请人： 华南理工大学

发明人： 段玉友 ,  吴海滨 ,  陈洪林

IPC分类号： C12N5/071 ,  C12N5/074 ,  C12Q1/02

公开(公告)号：CN110872572B

公开(公告)日：2023-02-14

申请号：CN201911189173.1

申请日：2019-11-27

申请人： 华南理工大学

发明人： 段玉友 ,  唐湘莲 ,  吴海滨 ,  陈洪林

IPC分类号： C12N5/0735 ,  C12N5/074 ,  C12N5/02

摘要： 本发明属于细胞培养的技术领域，公开了一种提高人多功能干细胞体外悬浮培养的效率的方法。所述提高人多功能干细胞体外悬浮培养效率的方法：将人多功能干细胞用含聚乙烯醇或葡聚糖硫酸酯与聚乙烯醇的培养基进行三维培养；所述葡聚糖硫酸酯在培养基中的浓度为10～100ug/ml；所述聚乙烯醇在培养基中的浓度为0.1～1mg/ml。本发明的方法不仅能够减少细胞聚集体的大小且得到尺寸均一的聚集体，还能达到较高的细胞数量以满足体外扩增人多功能干细胞的需求，提高了人多功能干细胞的培养效率。