公开(公告)号：CN102534049A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201210027972.0

申请日：2012-02-09

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王瑞龙 ,  曾任森 ,  梁笑婷 ,  辛效威 ,  宋圆圆 ,  苏贻娟 ,  骆世明

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明公开了一种薇甘菊萎蔫病毒基因诊断试剂盒及检测方法，该试剂盒包含两对特异性引物，分别是：MMWV RNA1 F：5’-TGAGGAATTGGGAAGGTC；MMWV RNA1 R：5’-CGACTCGGCGTCATAAAC；MMWV RNA2 F：5’-GGAATCCCTGAAACTATGC；MMWV RNA2 R：5’-TGCTCCACCAATCACAACA。检测方法包括以下步骤：(1)提取待测植物样品的RNA；(2)往RNA中分别加入两种引物，PCR扩增后分别得到两种cDNA；(3)往两种cDNA中分别加入两种引物，PCR扩增得到两种扩增产物；电泳，若扩增产物1在329bp出现明亮的条带，同时扩增产物2在364bp出现明亮的条带，则MMWV为阳性，说明待测植物样品中携带薇甘菊萎蔫病毒。本发明的试剂盒和方法可以特异性地扩增携带MMWV病毒的待测样品的相关基因片段，所建立的PCR反应体系保证检测结果的快速性、稳定性和准确性。

公开(公告)号：CN102534049B

公开(公告)日：2013-06-05

申请号：CN201210027972.0

申请日：2012-02-09

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王瑞龙 ,  曾任森 ,  梁笑婷 ,  辛效威 ,  宋圆圆 ,  苏贻娟 ,  骆世明

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明公开了一种薇甘菊萎蔫病毒基因诊断试剂盒及检测方法，该试剂盒包含两对特异性引物，分别是：MMWV RNA1 F：5’-TGAGGAATTGGGAAGGTC；MMWV RNA1 R：5’-CGACTCGGCGTCATAAAC；MMWV RNA2 F：5’-GGAATCCCTGAAACTATGC；MMWV RNA2 R：5’-TGCTCCACCAATCACAACA。检测方法包括以下步骤：(1)提取待测植物样品的RNA；(2)往RNA中分别加入两种引物，PCR扩增后分别得到两种cDNA；(3)往两种cDNA中分别加入两种引物，PCR扩增得到两种扩增产物；电泳，若扩增产物1在329bp出现明亮的条带，同时扩增产物2在364bp出现明亮的条带，则MMWV为阳性，说明待测植物样品中携带薇甘菊萎蔫病毒。本发明的试剂盒和方法可以特异性地扩增携带MMWV病毒的待测样品的相关基因片段，所建立的PCR反应体系保证检测结果的快速性、稳定性和准确性。