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公开(公告)号:CN114990144B
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202210521633.1
申请日:2022-05-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶介导的DNA组装载体及其应用。本发明所述DNA组装载体包含一个由特异核苷酸序列、具有筛选标记功能的基因表达盒和缺刻酶位点组成的一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶组装元件(UNiE),可用于长片段DNA克隆和多基因片段的高效组装。本发明同时将UNiE元件与多基因叠加系统(TGSII)相结合,构建了一个组装效率更高的新型多基因叠加系统(TGSII‑UNiE),实现了对多基因的高效组装,具有效率高、操作简便和成本低的特点。
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公开(公告)号:CN117024540A
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202310775433.3
申请日:2023-06-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种水稻杂种不育相关基因Sc‑P1和Sc‑P3及其编码蛋白和应用。本发明利用遗传学分析方法鉴定到了杂种不育座位Sci的组成基因Sc‑P1和Sc‑P3,并针对Sc‑P1和Sc‑P3选取合适的基因编辑位点,利用基因工程技术分别对Sc‑P1和Sc‑P3进行定点敲除。在证明敲除Sc‑P1或Sc‑P3不影响植株花粉育性的基础上,分别以sc‑p1和sc‑p3突变系与粳稻杂交的杂种F1的花粉育性正常,即消除了Sci座位杂种不育的遗传效应。本发明提供的水稻杂种不育相关基因Sc‑P1和Sc‑P3,可有效地消除Sci座位介导的远缘杂种生殖障碍,对突破水稻远缘杂种优势利用瓶颈具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN114524879B
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202111603075.5
申请日:2021-12-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含水稻密码子序列偏好性优化的核酸序列编码的SpCas9变体融合蛋白TadA8e‑DBD‑SpRY(hyABE8e‑SpRY),从N端到C端,依次核定位信号bpNLS,脱氨酶TadA8e,DNA单链结合域DBD,SpCas9缺刻酶变体SpRYn,以及核定位信号bpNLS。相比现有植物腺嘌呤单碱基编辑器,本发明构建的腺嘌呤单碱基编辑器具有高效、广靶向识别几乎所有NNN‑PAM、更宽的编辑窗口、无靶序列偏好性、可检测的自靶向sgRNA效应、以及脱靶效率低的特点。
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公开(公告)号:CN114990144A
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN202210521633.1
申请日:2022-05-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶介导的DNA组装载体及其应用。本发明所述DNA组装载体包含一个由特异核苷酸序列、具有筛选标记功能的基因表达盒和缺刻酶位点组成的一种由特异核苷酸序列引导的缺刻酶组装元件(UNiE),可用于长片段DNA克隆和多基因片段的高效组装。本发明同时将UNiE元件与多基因叠加系统(TGSII)相结合,构建了一个组装效率更高的新型多基因叠加系统(TGSII‑UNiE),实现了对多基因的高效组装,具有效率高、操作简便和成本低的特点。
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公开(公告)号:CN114524879A
公开(公告)日:2022-05-24
申请号:CN202111603075.5
申请日:2021-12-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含水稻密码子序列偏好性优化的核酸序列编码的SpCas9变体融合蛋白TadA8e‑DBD‑SpRY(hyABE8e‑SpRY),从N端到C端,依次核定位信号bpNLS,脱氨酶TadA8e,DNA单链结合域DBD,SpCas9缺刻酶变体SpRYn,以及核定位信号bpNLS。相比现有植物腺嘌呤单碱基编辑器,本发明构建的腺嘌呤单碱基编辑器具有高效、广靶向识别几乎所有NNN‑PAM、更宽的编辑窗口、无靶序列偏好性、可检测的自靶向sgRNA效应、以及脱靶效率低的特点。
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