公开(公告)号：CN112695052A

公开(公告)日：2021-04-23

申请号：CN202011568864.5

申请日：2020-12-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李虹辉 ,  杨金易 ,  王弘 ,  徐振林 ,  孙远明

IPC: C12N15/70 ,  C12P21/02 ,  C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36

Abstract: 本发明公开了一种重组人糖皮质激素受体GRα‑His蛋白及其表达和纯化方法。本发明通过构建重组人糖皮质激素受体GRα蛋白的原核表达载体，使重组人糖皮质激素受体GRα在大肠杆菌中高效表达，表达的重组蛋白以融合蛋白形式存在，经纯化、鉴定获得重组人糖皮质激素受体GRα‑His蛋白。本发明的重组人糖皮质激素受体GRα‑His蛋白通过SPR技术检测与糖皮质激素药物(氢化可的松、地塞米松、泼尼松)结合，显示其均具有较强的亲和力，其亲和力分别为2.99×10‑5M、5.41×10‑4M、1.51×10‑4M，有利于检测动物源性食品药品中糖皮质激素的残留。

公开(公告)号：CN112553231A

公开(公告)日：2021-03-26

申请号：CN202011568865.X

申请日：2020-12-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李虹辉 ,  杨金易 ,  王弘 ,  徐振林 ,  孙远明

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明公开了一种重组人热休克蛋白HSP90‑His及其表达和纯化方法。本发明通过构建重组人热休克蛋白HSP90的原核表达载体，使重组人热休克蛋白HSP90在大肠杆菌中高效表达，表达的重组蛋白以融合蛋白形式存在，经纯化、鉴定获得重组人热休克蛋白HSP90‑His。本发明的重组人热休克蛋白HSP90‑His通过SPR技术检测与糖皮质激素受体GRα结合，显示重组人热休克蛋白HSP90‑His具有较强的亲和力，其亲和力为1.44×10‑8M，有利于构建GRα‑HSP90蛋白复合体介导的分子开关型糖皮质激素检测方法，为糖皮质激素检测研究提供新的思路和依据。