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公开(公告)号:CN118759184A
公开(公告)日:2024-10-11
申请号:CN202410905186.9
申请日:2024-07-08
Applicant: 华侨大学
IPC: G01N33/573 , G16B15/00 , G16C10/00 , C12N9/10 , C12P19/62
Abstract: 本发明公开了一种基于结构的糖基转移酶的linker筛选方法,属于半理性设计对酶改造技术领域。本发明从天然糖基转移酶中筛选得到天然linker序列,通过AlphaFold2预测构建嵌合体模型,利用分子动力学模拟、分子对接等生信方法对嵌合体进行评估筛选,将筛选的嵌合体序列,送至公司合成序列,经过菌株培养,糖基转移酶表达与纯化,在加入EpoB和糖供体情况下,嵌合体糖基转移酶若能够催化糖受体EpoB进行糖基化则证明linker选择正确。本发明确定了基于生信手段对构建的嵌合体进行筛选的方法。本发明操作方便,原理简单,在生物催化制备EpoB糖基化衍生物具有较好的工业应用前景,对于今后酶改造与设计的开发提供了新的思路,并且对抗肿瘤药物的修饰与研发具有较为重要的意义。