二个甘草蔗糖合酶及其在合成甘草次酸糖基化衍生物中的应用

    公开(公告)号:CN110055232B

    公开(公告)日:2020-08-25

    申请号:CN201910022893.2

    申请日:2019-01-10

    Abstract: 本发明涉及二个甘草蔗糖合酶及其在合成甘草次酸糖基化衍生物中的应用。本发明通过对乌拉尔甘草基因组数据库的系统分析,从乌拉尔甘草细胞中克隆得到二种来源于新型甘草蔗糖合酶基因GuSuS1和GuSuS2及其编码的蛋白,在大肠杆菌细胞中成功异源表达,并验证其催化功,同时偶联蔗糖合酶GuSuS1和糖基转移酶UGT73C11构建UDP循环再生系统,该系统可催化甘草次酸合成3‑O‑单葡萄糖基甘草次酸、30‑O‑单葡萄糖基甘草次酸、3‑O‑单葡萄糖基‑30‑O‑单葡萄糖基甘草次酸三种甘草次酸糖基化衍生物。本发明填补了甘草蔗糖合酶研究方面的空白,为后续甘草细胞蔗糖及核苷糖代谢相关研究提供了一定的参考和依据,同时提供的UDP循环再生体系也大大简便了甘草次酸糖基化修饰过程。

    二个甘草蔗糖合酶及其在合成甘草次酸糖基化衍生物中的应用

    公开(公告)号:CN110055232A

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201910022893.2

    申请日:2019-01-10

    Abstract: 本发明涉及二个甘草蔗糖合酶及其在合成甘草次酸糖基化衍生物中的应用。本发明通过对乌拉尔甘草基因组数据库的系统分析,从乌拉尔甘草细胞中克隆得到二种来源于新型甘草蔗糖合酶基因GuSuS1和GuSuS2及其编码的蛋白,在大肠杆菌细胞中成功异源表达,并验证其催化功,同时偶联蔗糖合酶GuSuS1和糖基转移酶UGT73C11构建UDP循环再生系统,该系统可催化甘草次酸合成3-O-单葡萄糖基甘草次酸、30-O-单葡萄糖基甘草次酸、3-O-单葡萄糖基-30-O-单葡萄糖基甘草次酸三种甘草次酸糖基化衍生物。本发明填补了甘草蔗糖合酶研究方面的空白,为后续甘草细胞蔗糖及核苷糖代谢相关研究提供了一定的参考和依据,同时提供的UDP循环再生体系也大大简便了甘草次酸糖基化修饰过程。

    一种酶法制备单糖基甘草次酸半乳糖苷衍生物的方法

    公开(公告)号:CN109371080A

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201811196680.3

    申请日:2018-10-15

    Abstract: 本发明克隆了来自植物大豆的糖基转移酶基因GmSGT2,并在大肠杆菌中异源表达糖基转移酶GmSGT2。在pH 7.5、温度35℃条件下,以尿苷二磷酸半乳糖为糖基供体,GmSGT2可以转移1分子半乳糖到3-O-葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)和3-O-葡萄糖基甘草次酸(GLMG),高效合成Gal-GAMG和Gal-GLMG。进一步克隆来自植物大豆的蔗糖合酶基因GmSusy和来自大肠杆菌的UDP-葡萄糖-4-差向异构酶基因GalE,并在大肠杆菌中异源表达蔗糖合酶GmSusy和UDP-葡萄糖-4-差向异构酶GalE。以GmSGT2偶联GmSusy和GalE构建含有UDP循环的多酶体系,在pH 7.0、温度40℃条件下,以尿苷二磷酸及蔗糖为底物,可以转移1分子半乳糖到GAMG和GLMG,实现高效、低成本合成Gal-GAMG和Gal-GLMG。

    一种酶法制备单糖基甘草次酸半乳糖苷衍生物的方法

    公开(公告)号:CN109371080B

    公开(公告)日:2022-02-11

    申请号:CN201811196680.3

    申请日:2018-10-15

    Abstract: 本发明克隆了来自植物大豆的糖基转移酶基因GmSGT2,并在大肠杆菌中异源表达糖基转移酶GmSGT2。在pH 7.5、温度35℃条件下,以尿苷二磷酸半乳糖为糖基供体,GmSGT2可以转移1分子半乳糖到3‑O‑葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)和3‑O‑葡萄糖基甘草次酸(GLMG),高效合成Gal‑GAMG和Gal‑GLMG。进一步克隆来自植物大豆的蔗糖合酶基因GmSusy和来自大肠杆菌的UDP‑葡萄糖‑4‑差向异构酶基因GalE,并在大肠杆菌中异源表达蔗糖合酶GmSusy和UDP‑葡萄糖‑4‑差向异构酶GalE。以GmSGT2偶联GmSusy和GalE构建含有UDP循环的多酶体系,在pH 7.0、温度40℃条件下,以尿苷二磷酸及蔗糖为底物,可以转移1分子半乳糖到GAMG和GLMG,实现高效、低成本合成Gal‑GAMG和Gal‑GLMG。

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