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公开(公告)号：CN118755869A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202411016432.1
申请日：2024-07-27
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12a的可视化检测葡萄溃疡病菌的方法，属于植物真菌病原物分子检测技术领域。本发明通过选择Tub基因作为靶向基因，设计了一组RPA特异性引物和特异性CrRNA，并对反应体系进行了优化，将RPA扩增方法与CRISPR/Cas12a的检测方法相结合来检测葡萄溃疡病菌，通过侧流层析试纸条实现检测结果可视化。本发明的检测方法具有较好的特异性和灵敏度，操作简单快速，只需要简单的恒温仪器就可进行扩增反应，可在田间或基层工作现场对葡萄溃疡病菌进行检测。
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公开(公告)号：CN117821640A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202311817443.5
申请日：2023-12-27
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种葡萄黑根病的分子检测方法与应用。该分子检测方法为葡萄黑根病的三重实时荧光定量PCR检测方法。该方法设计了三组特异性引物和探针，并对反应体系进行了优化，建立了三重实时荧光定量PCR检测方法，能够同时检测出多种葡萄黑根病菌。所提供的分子检测方法可用于对葡萄黑根病菌纯培养的检测鉴定，也能对葡萄病样进行检测。本发明的检测引物特异性强、灵敏度较高、操作简便，能够实现葡萄黑根病的早期检测，对葡萄黑根病的早期预警和防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN106701968B
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN201710045658.8
申请日：2017-01-22
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一组同时检测葡萄溃疡病菌和葡萄蔓枯病菌的双重PCR引物及其应用。该组引物，由序列表中序列1所示的核苷酸、序列表中序列2所示的核苷酸、序列表中序列3所示的核苷酸和序列表中序列4所示的核苷酸组成。这组引物可以在一个双重PCR反应中分别检测到我国3个葡萄溃疡病菌优势种——小新壳梭孢、可可毛色二孢和葡萄座腔菌与4种葡萄蔓枯病菌的存在，这表明该组引物可以快速、准确、灵敏的确定葡萄苗木以及田间葡萄病样中的葡萄溃疡病菌和葡萄蔓枯病菌，为苗木带菌检测和针对性防治这2类病原菌引起的葡萄枝干病害提供依据。
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公开(公告)号：CN106399300B
公开(公告)日：2019-03-05
申请号：CN201611038267.5
申请日：2016-11-11
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种提取葡萄溃疡病菌菌丝RNA的方法。该方法包括：将液氮中保存的葡萄溃疡病菌菌丝，液氮中磨成粉末；将粉末转入预冷的离心管中，以每90‑110mg粉末加1mL的比例加入Trizol抽提液，摇动使其混匀，室温下放置；加入氯仿，剧烈震荡，室温放置，离心；取上清液于一新的离心管中，加入异丙醇和沉淀缓冲液，颠倒混匀；离心；弃去上清液，加1mL体积百分浓度为75％的乙醇溶液清洗RNA沉淀块，离心弃上清；重复清洗操作；弃乙醇，开盖室温放置10‑15min，或真空干燥，使乙醇完全挥发；获得的沉淀即RNA产物。本发明的方法提取的RNA具有纯度高、产量高的优点。
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公开(公告)号：CN106399300A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201611038267.5
申请日：2016-11-11
Applicant: 北京市农林科学院
CPC classification number: C12Q1/6806 , C12Q2523/32
Abstract: 本发明公开了一种提取葡萄溃疡病菌菌丝RNA的方法。该方法包括：将液氮中保存的葡萄溃疡病菌菌丝，液氮中磨成粉末；将粉末转入预冷的离心管中，以每90-110mg粉末加1mL的比例加入Trizol抽提液，摇动使其混匀，室温下放置；加入氯仿，剧烈震荡，室温放置，离心；取上清液于一新的离心管中，加入异丙醇和沉淀缓冲液，颠倒混匀；离心；弃去上清液，加1mL体积百分浓度为75％的乙醇溶液清洗RNA沉淀块，离心弃上清；重复清洗操作；弃乙醇，开盖室温放置10-15min，或真空干燥，使乙醇完全挥发；获得的沉淀即RNA产物。本发明的方法提取的RNA具有纯度高、产量高的优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105340931A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510736697.3
申请日：2015-11-03
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: A01N47/26 , A01N43/653 , A01P3/00
CPC classification number: A01N47/26 , A01N43/653 , A01N2300/00
Abstract: 本发明公开了一种防治葡萄白粉病的杀菌抑菌组合物。该组合物由苯醚甲环唑与福美双组成，其中苯醚甲环唑与福美双的重量比为1:2～4。本发明的组合物，将苯醚甲环唑与福美双复配，具有明显增效作用。
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公开(公告)号：CN103333808A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310278366.0
申请日：2013-07-04
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一种用于葡萄霜霉病菌单孢分离扩繁的方法。该方法，首先诱导采集的霜霉病样重新产生游动孢子囊，将新产生的单个游动孢子囊或单根孢囊梗用针灸针（规格Ф0.25×40mm）转移到1%次氯酸钠处理过的无菌的对葡萄霜霉病菌敏感的葡萄叶圆片上，在18℃,16h光周期地恒温培养箱中培养7-10d，在叶圆片上形成的菌落即为分离到的葡萄霜霉病菌纯培养。该方法简便易行，并且能够以较高的成功率分离得到葡萄霜霉病菌，解决了传统真菌分离方法不适用于葡萄霜霉病菌单孢分离扩繁的问题。
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公开(公告)号：CN102747078A
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201210229358.2
申请日：2012-07-03
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一对用于快速检测葡萄溃疡病菌Neofusicoccum parvum菌种的引物及其应用。该对引物，它们的核苷酸序列分别为序列表中序列1和序列表中序列2，能够在葡萄溃疡病菌Neofusicoccum parvum特异性的扩增出370bp的产物，对Neofusicoccum parvum菌种基因组DNA的灵敏度可达10pg。这表明该引物对可以用于田间葡萄病样中Neofusicoccum parvum菌种的快速可靠的检测和鉴定，克服传统鉴定方法步骤繁琐、鉴定周期长等问题。
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公开(公告)号：CN115018131B
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202210539840.X
申请日：2022-05-18
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: G06Q10/04 , G06Q50/02 , G06N20/00 , G06F30/27 , G06F119/08
Abstract: 本发明公开了一种在地区间可移植的模拟葡萄霜霉病病叶率的方法。该方法包括：定义葡萄品种对霜霉病的感病水平，获取待模拟葡萄品种的花期阈值，根据葡萄霜霉病病原菌侵染规律建立葡萄霜霉病病叶率模拟模型，利用梯度下降法优化模型参数的取值；当葡萄花期时间到达，将优化的参数值代入模型中，驱动模型开始模拟葡萄霜霉病病叶率。本发明的技术方案可以根据本地栽培的气候条件和品种，通过历史数据本地化校正参数，较为准确地模拟葡萄霜霉病病叶率，根据葡萄霜霉病病叶率的发展调整用药次数，为开展可持续绿色种植园区提供技术支持。
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公开(公告)号：CN116445357A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310482724.3
申请日：2023-05-02
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用。本发明的贝莱斯芽孢杆菌菌株BJ‑1的保藏编号为CGMCC No.24113。本发明的贝莱斯芽孢杆菌菌株具有对植物病原菌的抑菌活性并且具有较宽的抑菌谱。室内离体叶片接种试验结果表明，贝莱斯芽孢杆菌BJ‑1发酵液对番茄灰霉病具有较好的保护和治疗作用，1×107CFU/mLBJ‑1发酵液对番茄灰霉病的保护和治疗作用相对防效分别可达68.95％和88.28％。田间试验结果表明，贝莱斯芽孢杆菌BJ‑1水分散粒剂对番茄灰霉病具有较好的防治效果，2.0×1010CFU/克贝莱斯芽孢杆菌BJ‑1水分散粒剂处理(450克/亩)的相对防效可达80.48％。本发明的贝莱斯芽孢杆菌具有生防潜力，可用于制备针对植物病原真菌的生防菌剂和微生物菌肥。
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