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公开(公告)号:CN107904326A
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201711318180.8
申请日:2017-12-12
Applicant: 北京市农林科学院
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/166 , C12Q2545/113 , C12Q2521/107
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了一组用于RT-PCR快速分型检测禽偏肺病毒亚型的核酸,其特征在于,包括用于检测禽偏肺病毒A型的引物对1、用于检测禽偏肺病毒B型的引物对2、用于检测禽偏肺病毒C型的引物对3和用于检测禽偏肺病毒D型的引物对4;其中,所述引物对1的序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,所述引物对2的序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示,所述引物对3的序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示,所述引物对4的序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示。上述核酸可用于分别检测禽偏肺病毒A、B、C、D四种亚型,其所用引物的特异性强,各引物对之间没有交叉反应,与其它病毒也没有交叉反应。
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公开(公告)号:CN105296439A
公开(公告)日:2016-02-03
申请号:CN201510700997.6
申请日:2015-10-26
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种鸡C型禽偏肺病毒毒株aMPV/C-JCX及其应用,所述病毒毒株的保藏号为CGMCC No.10900。该病毒是收集国内首次分离到的鸡C型禽偏肺病毒感染病鸡组织研磨液,接种贴壁生长的单层非洲绿猴肾细胞Vero,细胞培养物作为下一轮传代的接种物,依次连续传代获得一株细胞培养适应毒株。在适应过程中,早代次培养周期为7-9天,传至60代后缩短至3-5天可以观察到明显的细胞病变。经过透射电镜、间接免疫荧光和蛋白质印迹法证实该细胞能够有效的培养C型禽偏肺病毒。病毒的滴度lgTCID50=10-4.2/0.1ml。经过SPF鸡证实该病毒毒力较弱,具有良好的免疫原性和保护性,该细胞适应毒是研究生产病毒疫苗的理想候选毒株。
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公开(公告)号:CN103360498A
公开(公告)日:2013-10-23
申请号:CN201310323802.1
申请日:2013-07-30
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一种抗鸡传染性法氏囊病(IBD)的亚单位疫苗,该疫苗是具有较高免疫原性的鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白(flagellin)和传染性法氏囊病病毒(VP2)的融合蛋白。上述flagellin+VP2融合蛋白,是利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建含有flagellin+VP2基因的重组杆状病毒来表达的。通过上述系统获得重组杆状病毒的周期短,且表达的flagellin+VP2融合蛋白具有较高的免疫保护力。
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公开(公告)号:CN103360472A
公开(公告)日:2013-10-23
申请号:CN201310325109.8
申请日:2013-07-30
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C07K14/115 , C12N15/45 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种禽偏肺病毒抗体ELISA检测试剂盒,该试剂盒是基于A亚群禽偏肺病毒F蛋白的单体蛋白为包被抗原建立的检测禽偏肺病毒抗体的ELISA试剂盒。本发明还提供了用于制备上述试剂盒的包被抗原即F蛋白的单体蛋白的制备方法,通过本发明提供的方法制备的F蛋白具有良好的反应原性,且本发明所建立的ELISA检测试剂盒为禽偏肺病毒感染的早期诊断和检测提供了有效的方法,为该疾病的预防研究起到了显著促进作用。
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公开(公告)号:CN108219000B
公开(公告)日:2021-05-25
申请号:CN201810046234.8
申请日:2018-01-17
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种PEDV保护性抗原蛋白及其在乳酸菌中表达的方法。含PEDV保护性抗原蛋白包含S1P1、S1P2、S1P3、SS5和SS6表位的PEDV保护性抗原位点片段,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了一种含PEDV保护性抗原蛋白在乳酸菌中表达的方法,其能在乳酸菌中很好地诱导表达出PEDV保护性抗原蛋白,为今后乳酸菌口服疫苗的研究奠定基础。
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公开(公告)号:CN111748515A
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN201910248819.2
申请日:2019-03-29
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一株Vero克隆细胞株及其应用,用于高效生产猪流行性腹泻病毒。所述的细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CGMCC NO:16294,本发明采用有限稀释法进行Vero单细胞克隆,获得一株单克隆细胞株命名为2B8,该克隆细胞株比母本细胞生长速度快,能够很好繁殖猪流行性腹泻病毒,显著提高病毒在细胞上的复制水平,相比母本细胞,利用该细胞株能够获得高效价的病毒液,在疫苗生产中应用价值高。
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公开(公告)号:CN109251897A
公开(公告)日:2019-01-22
申请号:CN201811031496.3
申请日:2018-09-05
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒3型毒株PCV3-LY及其应用。该病毒是国内外首次通过感染性克隆技术拯救出的猪圆环病毒3型,接种贴壁生长的单层猪肾细胞PK15细胞培养后,进行D-氨基葡萄糖处理而后继续培养,收获细胞培养物作为下一轮传代的接种物,依次连续传代获得一株细胞培养适应毒株。在适应过程中,传至15代后可以观察到明显的细胞病变。经过间接免疫荧光证实该细胞能够支持猪圆环病毒3型的有效复制。病毒的滴度lgTCID50=106.53/mL。动物回归试验发现5头28日龄猪攻毒后可以致死两头,该病毒对仔猪致病力较强。这是国内外首次通过感染性克隆技术拯救出的猪圆环病毒3型,为进一步研究PCV3的致病机制以及开展有效防控该病的疫苗研究提供直接支持。
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公开(公告)号:CN103739717A
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201410018219.4
申请日:2014-01-15
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一种抗猪2型圆环病毒病的重组亚单位疫苗,该疫苗是具有较高免疫原性的鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白(flagellin)和猪2型圆环病毒Cap蛋白的融合蛋白。本发明通过将人工编码的Flagellin-ORF2、Flagellin-ΔORF2基因融合克隆进pFastBac表达载体,同ORF2、ΔORF2重组克隆(pFastBac载体)一起转染Sf9细胞,利用杆状病毒系统表达四个融合蛋白,并通过间接免疫荧光(IFA)和Western-blot进行鉴定。通过上述系统获得重组杆状病毒的周期短,且表达的flagellin+Cap融合蛋白具有较高的免疫保护力。
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公开(公告)号:CN111748515B
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN201910248819.2
申请日:2019-03-29
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一株Vero克隆细胞株及其应用,用于高效生产猪流行性腹泻病毒。所述的细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CGMCC NO:16294,本发明采用有限稀释法进行Vero单细胞克隆,获得一株单克隆细胞株命名为2B8,该克隆细胞株比母本细胞生长速度快,能够很好繁殖猪流行性腹泻病毒,显著提高病毒在细胞上的复制水平,相比母本细胞,利用该细胞株能够获得高效价的病毒液,在疫苗生产中应用价值高。
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公开(公告)号:CN107904326B
公开(公告)日:2021-06-22
申请号:CN201711318180.8
申请日:2017-12-12
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了一组用于RT‑PCR快速分型检测禽偏肺病毒亚型的核酸,其特征在于,包括用于检测禽偏肺病毒A型的引物对1、用于检测禽偏肺病毒B型的引物对2、用于检测禽偏肺病毒C型的引物对3和用于检测禽偏肺病毒D型的引物对4;其中,所述引物对1的序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,所述引物对2的序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示,所述引物对3的序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示,所述引物对4的序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示。上述核酸可用于分别检测禽偏肺病毒A、B、C、D四种亚型,其所用引物的特异性强,各引物对之间没有交叉反应,与其它病毒也没有交叉反应。
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