公开(公告)号：CN118006686A

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202410410702.0

申请日：2024-04-08

Applicant: 北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院)

Inventor： 于瑶 ,  曲音音 ,  郭向阳 ,  李正迁 ,  周阳 ,  侯婷婷 ,  童泽鑫 ,  张译尹 ,  冯路旸

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/12

Abstract: 本发明涉及一种全长小鼠RYR1基因外源性表达质粒及其构建方法和应用，属于生物工程领域，解决了现有技术难以扩增得到全长RYR1基因，无法满足对于RYR1基因表达及功能的体外研究需要的问题。所示构建方法，包括将pcDNA3.1‑3Myc‑His质粒进行双酶切，得到线性化载体；获取小鼠RYR1基因片段，将基因片段分别连接到线性化载体中，构建含有基因片段的重组表达质粒；采用PCR扩增体系对含有基因片段的重组表达质粒进行扩增，得到PCR产物，采用电泳回收PCR产物，得到扩增后的RYR1基因片段；通过无缝克隆的方式将扩增后的RYR1基因片段连接到线性化载体上，构建得到全长小鼠RYR1基因外源性表达质粒。