基于荧光定量PCR筛选痕量内分泌干扰物的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN112126680A

    公开(公告)日:2020-12-25

    申请号:CN202011031870.7

    申请日:2020-09-27

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 贾晓静 张照斌

    Abstract: 本发明公开了一种基于荧光定量PCR筛选痕量内分泌干扰物的试剂盒及方法,包含生物磁珠‑NR‑LBD蛋白溶液、NCoA‑DNA标签嵌合物溶液、一对特异性引物、结合反应液以及荧光定量PCR反应体系。本发明首先将活化的生物磁珠‑NR‑LBD蛋白溶液、NCoA‑DNA标签嵌合物溶液和适量体积的待测物质用结合反应液共同孵育,然后磁性分离清洗所述检测体系并用1×荧光定量PCR反应体系重悬,再加入特异性引物进行荧光定量PCR扩增,根据Ct值定量表征待测物质的核受体活性。本试剂盒及检测方法具有特异性强、重复性好、检出限低、超高灵敏度、测试通量高、快速简便的优点。

    一种空气或水中病毒核酸的实时在线快速检测装置

    公开(公告)号:CN117229902B

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202311523093.1

    申请日:2023-11-16

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开一种空气或水中病毒核酸的实时在线快速检测装置,涉及卫生防疫和生物检测领域,该装置包括病毒富集与核酸在线提取纯化模块,该模块包括两个病毒在线富集单元和一个核酸在线提取纯化单元;还包括核酸在线扩增模块,该模块包括反转录单元和管式PCR单元;以及还包括数据记录分析与控制系统,该系统包括荧光实时定量检测系统、温度控制系统、超声波控制系统和动力控制系统,用于为病毒富集与核酸在线提取纯化模块和核酸在线扩增模块提供动力、超声、温度、光学检测条件,并负责数据记录、分析和报警。本装置能够实时、在线、快速、准确检测环境中特定病毒,满足特定现场不间断病毒实时在线检测的需求。

    一种基于中国青鳉的化学品毒性高内涵快速筛查方法

    公开(公告)号:CN113804524A

    公开(公告)日:2021-12-17

    申请号:CN202111003329.X

    申请日:2021-08-30

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 张照斌 贾晓静

    Abstract: 本发明公开了一种基于中国青鳉的化学品毒性高内涵快速筛查方法,涉及环境化合物的检测技术领域,本方法利用中国青鳉胚胎、细胞、幼鱼或雄鱼精子,建立化学物质毒性评价模型,通过进行暴露实验,利用高内涵成像分析系统进行成像扫描,检测受试物的胚胎、器官、幼体和精子毒性。本发明方法取材方便、准确性好、灵敏度高、测试通量高,能够快速识别不同作用模式的环境内分泌干扰物,系统表征其毒性信息,在环境水体毒性识别与生态风险评价中有较好的应用前景。

    一种基于磁性微球快速检测化学物质内分泌干扰活性的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN110095598A

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201910276982.X

    申请日:2019-04-08

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明提供了一种基于磁性微球快速检测化学物质内分泌干扰活性的试剂盒及方法,该试剂盒包含微球-GST/6×HIS-NR LBD蛋白聚合物溶液、SRC-BAP蛋白溶液、BSA溶液、反应液、清洗液、显色液和显色终止液。本发明通过将活化的微球-蛋白聚合物溶液、SRC-BAP蛋白溶液、BSA溶液和待测物质混合孵育,清洗后添加显色液使其显色并终止,利用普通光学酶标仪测定吸光值,通过软件处理吸光值计算得到EC50或IC50,从而能够快速测定化学物质的受体活性。本发明提供的检测方法可以缩短实验周期、增强受体纯度和活性、提高检测灵敏度,从而实现高灵敏、高效快速地进行化学品内分泌干扰受体活性检测筛选的目的。

    幼鱼或鱼受精卵的DNA鉴定性别的方法

    公开(公告)号:CN100478675C

    公开(公告)日:2009-04-15

    申请号:CN200510011322.7

    申请日:2005-02-07

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明提供一种青鳉鱼受精卵或幼鱼的DNA鉴定性别的方法,属于鱼类胚胎和早期发育研究领域。该方法包括单个鱼卵或幼鱼的RNA和DNA同步提取技术;用Trizol试剂提取RNA后,剩余有机相中加入DNA提取缓冲液,混匀,50℃-75℃温浴后,低温离心10-15分钟,呈现上下两层,取上层水相加入核酸共沉剂,加入无水乙醇,离心,去除上清,酒精清洗,NaOH溶液溶解,调pH至8.0-8.4,得到单个鱼卵或幼鱼的DNA溶液;将提取的溶液作为模板DNA,加入性别特异PCR引物,进行PCR反应,PCR反应完成后,琼脂糖凝胶电泳检测,如出现目的条带为XY型雄鱼,未出现该条带为XX型雌鱼。本发明鉴定准确性高、效果显著。

    一种空气或水中病毒核酸的实时在线快速检测装置

    公开(公告)号:CN117229902A

    公开(公告)日:2023-12-15

    申请号:CN202311523093.1

    申请日:2023-11-16

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开一种空气或水中病毒核酸的实时在线快速检测装置,涉及卫生防疫和生物检测领域,该装置包括病毒富集与核酸在线提取纯化模块,该模块包括两个病毒在线富集单元和一个核酸在线提取纯化单元;还包括核酸在线扩增模块,该模块包括反转录单元和管式PCR单元;以及还包括数据记录分析与控制系统,该系统包括荧光实时定量检测系统、温度控制系统、超声波控制系统和动力控制系统,用于为病毒富集与核酸在线提取纯化模块和核酸在线扩增模块提供动力、超声、温度、光学检测条件,并负责数据记录、分析和报警。本装置能够实时、在线、快速、准确检测环境中特定病毒,满足特定现场不间断病毒实时在线检测的需求。

    一种快速检测化学品内分泌干扰活性的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN109827934B

    公开(公告)日:2020-12-22

    申请号:CN201910039763.X

    申请日:2019-01-16

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测化学品内分泌干扰活性的试剂盒,包含重组人核受体配体结合域hNR‑LBD蛋白溶液、重组人核受体共激活因子‑EcoR I融合蛋白溶液、特异性Taqman探针、A‑DTT缓冲液和B缓冲液。本发明同时还公开了一种快速检测化学品内分泌干扰活性的方法,该方法通过应用所述试剂盒在微孔板上实现对化学品内分泌干扰活性的快速检测。本发明通过Taqman荧光探针法,实现了高通量、多靶标、快速检测包括烷基苯酚类、对烷氧基酚类、尼泊金酯类、双酚类、联苯类、联苯醚类、有机磷类、卤素类化合物等化学品的内分泌干扰活性,检测上限达到10‑11M。

    一种高灵敏快速筛查内分泌干扰物的试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN112067825A

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN202010843658.4

    申请日:2020-08-20

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 贾晓静 张照斌

    Abstract: 本发明公开了一种高灵敏快速筛查内分泌干扰物的试剂盒及方法,包含NR‑LBD蛋白溶液、磁性微球‑NCoA‑BAP‑BamH I交联聚合蛋白溶液、特异性双标记荧光探针和反应液。本发明首先将NR‑LBD蛋白溶液、活化的磁性微球‑NCoA‑BAP‑BamH I交联聚合蛋白溶液和适量体积的待测物质共同孵育,然后磁性分离清洗所述检测体系,再加入特异性双标记荧光探针,利用荧光定量PCR仪扩增检测荧光强度,最后通过软件计算得出待测物质的EC50或IC50。本发明所提供的试剂盒及检测方法操作简单、检测时长短、灵敏度高、重复性好,测试通量大,可广泛应用于大批量化学品内分泌干扰活性的快速检测。

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