抗草铵膦紫花苜蓿植株的培养基和土壤筛选方法

    公开(公告)号:CN104186308A

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201410429290.1

    申请日:2014-08-28

    Applicant: 兰州大学

    Abstract: 本发明主要涉及抗草铵膦紫花苜蓿植株的筛选方法。具体涉及抗草铵膦种质筛选方法。一种抗草铵膦紫花苜蓿植株的培养基筛选方法,其主要特点在于包括如下步骤:(1)MS培养基萌发种子;(2)剂量筛选;(3)甲基磺酸乙酯半致死剂量诱变紫花苜蓿种子;(4)抗草铵膦紫花苜蓿植株筛选;(5)抗性植株再次筛选。本发明与现有技术相比,具有以下优点和效果:本发明简便易行,见效快捷,在短期内可以获得抗除草剂紫花苜蓿的单株。本发明采用的是诱变手段。利用化学诱变剂EMS诱变紫花苜蓿种子产生点突变,通过培养基和土壤筛选两种途径筛选抗除草剂紫花苜蓿单株,不但为常规育种提供了新的种质资源,对其他植物的抗除草剂选育也提供了一定的参考。

    转录因子MaMYB4及其与MaTT8基因协同调控东莨菪苷生物合成的应用

    公开(公告)号:CN116200422B

    公开(公告)日:2025-03-11

    申请号:CN202310018641.9

    申请日:2023-01-06

    Applicant: 兰州大学

    Inventor: 张吉宇 段珍 吴凡

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及白花草木樨基因MaMYB4及其应用,本发明提供了促进植物器官产生东莨菪苷的转录因子MaMYB4及其应用。该发明的MaMYB4是一个MYB家族转录因子,完整编码框长度870个碱基,编码蛋白含290个氨基酸。过表达MaMYB4使白花草木樨毛状根中东莨菪苷积累,同时MaTT8可以与MaMYB4互作共同促进东莨菪苷的产生,结果对于丰富香豆素次生代谢物积累基础理论、改良现有白花草木樨品质缺陷、提高优质白花草木樨育种效率等实际应用具有重要意义。

    MaUGT79基因及其在正调控东莨菪苷生物合成和干旱胁迫应答中的应用

    公开(公告)号:CN116515867A

    公开(公告)日:2023-08-01

    申请号:CN202310018615.6

    申请日:2023-01-06

    Applicant: 兰州大学

    Inventor: 张吉宇 段珍 吴凡

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及白花草木樨基因MaUGT79及其应用,本发明以白花草木樨基因组数据和BSA重测序数据为基础,克隆MaUGT79基因,利用实时定量PCR技术分析在干旱胁迫下的表达模式,并构建重组原核表达载体验证MaUGT79基因功能,发现转基因大肠杆菌能够催化东莨菪内酯产生东莨菪苷;构建植物过表达载体和RNAi载体将该基因转化白花草木樨毛状根,验证MaUGT79基因参与东莨菪苷合成,具有抵抗干旱胁迫的功能,本发明为揭示MaUGT79基因的干旱耐受机制奠定基础,为植物耐旱分子育种提供基因资源和理论依据。

    抗草甘膦紫花苜蓿植株的筛选方法

    公开(公告)号:CN104255403B

    公开(公告)日:2015-06-17

    申请号:CN201410429650.8

    申请日:2014-08-28

    Applicant: 兰州大学

    Abstract: 本发明主要提供了产生对除草剂具有抗性的紫花苜蓿植株和方法。具体涉及利用化学诱变剂EMS诱变紫花苜蓿,筛选出对除草剂具有抗性的紫花苜蓿植株。一种抗草甘膦紫花苜蓿植株的培养基筛选方法,其特征在于包括如下步骤:(1)MS培养基萌发种子;(2)剂量筛选;(3)甲基磺酸乙酯半致死剂量诱变紫花苜蓿种子;(4)抗草甘膦紫花苜蓿植株筛选;(5)抗性植株再次筛选。本发明的优点简便易行,见效快捷,在短期内可以获得抗除草剂紫花苜蓿的单株。本发明采用的是诱变手段。利用化学诱变剂EMS诱变紫花苜蓿种子产生点突变,通过培养基和土壤筛选两种途径筛选抗除草剂紫花苜蓿单株,不但为常规育种提供了新的种质资源,对其他植物的抗除草剂选育也提供了一定的参考。

    抗草铵膦紫花苜蓿植株的培养基和土壤筛选方法

    公开(公告)号:CN104186308B

    公开(公告)日:2015-06-17

    申请号:CN201410429290.1

    申请日:2014-08-28

    Applicant: 兰州大学

    Abstract: 本发明主要涉及抗草铵膦紫花苜蓿植株的筛选方法。具体涉及抗草铵膦种质筛选方法。一种抗草铵膦紫花苜蓿植株的培养基筛选方法,其主要特点在于包括如下步骤:(1)MS培养基萌发种子;(2)剂量筛选;(3)甲基磺酸乙酯半致死剂量诱变紫花苜蓿种子;(4)抗草铵膦紫花苜蓿植株筛选;(5)抗性植株再次筛选。本发明与现有技术相比,具有以下优点和效果:本发明简便易行,见效快捷,在短期内可以获得抗除草剂紫花苜蓿的单株。本发明采用的是诱变手段。利用化学诱变剂EMS诱变紫花苜蓿种子产生点突变,通过培养基和土壤筛选两种途径筛选抗除草剂紫花苜蓿单株,不但为常规育种提供了新的种质资源,对其他植物的抗除草剂选育也提供了一定的参考。

    一种草木樨毛状根转化方法

    公开(公告)号:CN112795590B

    公开(公告)日:2022-11-01

    申请号:CN202110330271.3

    申请日:2021-03-29

    Applicant: 兰州大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种草木樨毛状根转化方法。采用该方法建立草木樨毛状根转化体系,可以在幼苗切根侵染后的两周左右获得转基因毛状根,这比用根癌农杆菌介导的遗传转化体系得到转基因植株要更加快速和简便,获得的毛状根的发生率和转化率分别为78±2%和70.8±4.2%,且超表达MaROP6的相对平均表达量为对照的36.87倍。这就表明利用发根农杆菌进行草木樨的毛状根转化可以作为一种草木樨结瘤基因功能研究的生物技术手段,并可能将其推广到包括抗逆机理研究在内的其他领域的发展,为草木樨基因功能的验证和遗传选育奠定基础。

    一种草木樨毛状根转化方法

    公开(公告)号:CN112795590A

    公开(公告)日:2021-05-14

    申请号:CN202110330271.3

    申请日:2021-03-29

    Applicant: 兰州大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种草木樨毛状根转化方法。采用该方法建立草木樨毛状根转化体系,可以在幼苗切根侵染后的两周左右获得转基因毛状根,这比用根癌农杆菌介导的遗传转化体系得到转基因植株要更加快速和简便,获得的毛状根的发生率和转化率分别为78±2%和70.8±4.2%,且超表达MaROP6的相对平均表达量为对照的36.87倍。这就表明利用发根农杆菌进行草木樨的毛状根转化可以作为一种草木樨结瘤基因功能研究的生物技术手段,并可能将其推广到包括抗逆机理研究在内的其他领域的发展,为草木樨基因功能的验证和遗传选育奠定基础。

    转录因子MaMYB4及其与MaTT8基因协同调控东莨菪苷生物合成的应用

    公开(公告)号:CN116200422A

    公开(公告)日:2023-06-02

    申请号:CN202310018641.9

    申请日:2023-01-06

    Applicant: 兰州大学

    Inventor: 张吉宇 段珍 吴凡

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及白花草木樨基因MaMYB4及其应用,本发明提供了促进植物器官产生东莨菪苷的转录因子MaMYB4及其应用。该发明的MaMYB4是一个MYB家族转录因子,完整编码框长度870个碱基,编码蛋白含290个氨基酸。过表达MaMYB4使白花草木樨毛状根中东莨菪苷积累,同时MaTT8可以与MaMYB4互作共同促进东莨菪苷的产生,结果对于丰富香豆素次生代谢物积累基础理论、改良现有白花草木樨品质缺陷、提高优质白花草木樨育种效率等实际应用具有重要意义。

    鉴定白花草木樨和黄花草木樨特异分子标记试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104278084B

    公开(公告)日:2015-11-18

    申请号:CN201410461065.6

    申请日:2014-09-11

    Applicant: 兰州大学

    Abstract: 本发明主要涉及一种根据片段长度鉴定白花草木樨(M.albus)和黄花草木樨(M.officinalis)的特异分子标记及其专用引物。具体包括白花草木樨和黄花草木樨基因组DNA的分子标记引物试剂盒及其检测方法。一种鉴定白花草木樨和黄花草木樨的特异分子标记,其主要特点包括有:白花草木樨和黄花草木樨的PCR检测体系相同,其中包括2×Eco Taq PCR SuperMix,引物Melilotus-F(5′-3′):GGTTCAAGTCCCTCTATC,引物Melilotus-R(5′-3′):CTTTACCGTTTGAGCTATCC,ddH2O。鉴定结果表明,该技术具有成本低、准确度高、稳定性好和简单快捷等特点,尤其是受测群体较大时,此种方法具有更显著的经济效应。

    鉴定白花草木樨和黄花草木樨特异分子标记试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104278084A

    公开(公告)日:2015-01-14

    申请号:CN201410461065.6

    申请日:2014-09-11

    Applicant: 兰州大学

    CPC classification number: C12Q1/6895

    Abstract: 本发明主要涉及一种根据片段长度鉴定白花草木樨(M.albus)和黄花草木樨(M.officinalis)的特异分子标记及其专用引物。具体包括白花草木樨和黄花草木樨基因组DNA的分子标记引物试剂盒及其检测方法。一种鉴定白花草木樨和黄花草木樨的特异分子标记,其主要特点包括有:白花草木樨和黄花草木樨的PCR检测体系相同,其中包括2×Eco Taq PCR SuperMix,引物Melilotus-F(5′-3′):GGTTCAAGTCCCTCTATC,引物Melilotus-R(5′-3′):CTTTACCGTTTGAGCTATCC,ddH2O。鉴定结果表明,该技术具有成本低、准确度高、稳定性好和简单快捷等特点,尤其是受测群体较大时,此种方法具有更显著的经济效应。

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