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公开(公告)号：CN105738495B
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201410768295.7
申请日：2014-12-12
申请人： 光明乳业股份有限公司
IPC分类号： G01N30/02
摘要： 本发明公开了一种区别巴氏杀菌乳和超高温灭菌乳的方法。该方法包括下述步骤：分别检测生乳样品和杀菌乳中某D型氨基酸占该种氨基酸总量的百分比，分别记为Dx0％和Dx1％，所述的D型氨基酸为D‑精氨酸、D‑天门冬氨酸、D‑谷氨酰胺和D‑丝氨酸中的一种或多种；根据D型氨基酸的百分比Dx1％和Dx0％在95％的置信水平上是否具有统计学意义的显著性差异来判断杀菌乳是超高温灭菌乳还是巴氏杀菌乳，当二者没有统计学意义的显著性差异时，判断杀菌乳是巴氏杀菌乳；当二者有统计学意义的显著性差异时，判断杀菌乳是超高温灭菌乳。本发明的方法能够准确区分巴氏杀菌乳和超高温灭菌乳，特别寻找到有效的牛乳热处理效果评价指标。
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公开(公告)号：CN104523777B
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201410784547.5
申请日：2014-12-16
申请人： 光明乳业股份有限公司
IPC分类号： A61K36/185 , A61P31/04
CPC分类号： Y02A50/473
摘要： 本发明公开了种薰倒牛总黄酮提取物、其提取方法及用途。该提取方法包括下列步骤:将薰倒牛原料粉末与溶剂混合,索氏提取后固液分离,得滤液A;将所述的滤液A浓缩至干,即得薰倒牛总黄酮提取物;其中,索氏提取的时间为2~24h;溶剂为有机溶剂或者有机溶剂与水的混合溶剂;有机溶剂与水的混合溶剂中,有机溶剂的体积百分比在40%以上;有机溶剂为醇类溶剂、氯代烃类溶剂、酯类溶剂和烷烃类溶剂中的种或多种;溶剂与薰倒牛原料粉末的体积质量比为1mL/g~60mL/g。本发明的提取方法的提取率高,总黄酮提取物的抗菌能力好,同时该提取方法操作简单,设备通用性好,提取溶剂可以回收利用,生产成本低,更适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN104498492A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410838721.X
申请日：2014-12-26
申请人： 光明乳业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种获得干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)特异性序列的方法及其使用的半随机引物。该半随机引物如SEQ ID NO.1所示。该方法包括步骤：(1)以两株以上干酪乳杆菌菌株的基因组DNA分别为模板，以SEQ ID NO.1所示半随机引物分别进行单引物PCR扩增；(2)对共有DNA片段进行测序并进行序列比对，若结果为共有DNA片段序列仅与序列已知的干酪乳杆菌的基因同源性大于99％，则将该序列作为干酪乳杆菌的特异性序列。该方法操作简单、快速、特异性强，无需知道目标细菌的核酸序列，也无需依赖大量的基因数据分析。该方法通用性强，成本低，实验时间短，具有十分广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN104498491A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410838715.4
申请日：2014-12-26
申请人： 光明乳业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)的特异性分子标记DNA序列及其用途以及嗜热链球菌的检测方法。该特异性分子标记DNA序列如SEQ ID NO.6所示。该检测方法包括步骤：(1)提取待测样本的基因组DNA；(2)以步骤(1)所得的基因组DNA为模板，以SEQ ID NO.1所示的半随机引物为扩增引物进行单引物PCR扩增；(3)对步骤(2)所得扩增产物进行克隆测序，并将测序结果与SEQ ID NO.6所示序列进行比对，若同源度大于99％，则表明待测样本中含有嗜热链球菌。
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公开(公告)号：CN104297381A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410618081.1
申请日：2014-11-05
申请人： 光明乳业股份有限公司
IPC分类号： G01N30/02
摘要： 本发明公开了一种游离的中链脂肪酸的测定方法，包括以下步骤：将待测样品和混合脂肪酸标样分别经萃取，气相色谱分离，质谱检测，即可；所述的待测样品包括待测物和内标溶液；所述的待测物为原料乳、液体乳制品或固体乳制品；当所述的待测物为原料乳或液体乳制品时，所述的待测样品还包括氯化钠；当所述的待测物为固体乳制品时，所述的待测样品还包括水；所述的混合脂肪酸标样包括外标溶液和内标溶液；所述的外标溶液为己酸、辛酸和癸酸中的一种或多种的乙醇水溶液；所述的内标溶液为庚酸的乙醇水溶液；所述的中链脂肪酸为己酸、辛酸和癸酸中的一种或多种。该方法操作简单、准确度高、精密度高和萃取效率高。
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公开(公告)号：CN102732517B
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201210251634.5
申请日：2012-07-19
申请人： 光明乳业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种用于PCR步移技术的半随机引物、试剂盒及运用所述试剂盒进行PCR步移的方法。所述半随机引物的序列如序列表中SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示。所述试剂盒包括所述半随机引物。所述方法同普通二条引物的PCR相类似，最多只需二轮PCR即可获得目标序列，操作简单、快速、高效。该方法通过提高了整个PCR循环过程中的退火温度，增加了扩增特异性，且对实验材料没有限制，微生物、动物和植物样品均可使用。本方法用于实验中可以简化操作，缩短实验时间，提高实验效率，降低实验成本，具有十分广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102757960A
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201210266240.7
申请日：2012-07-30
申请人： 光明乳业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒。半随机引物序列从5’端到3’端依次为：12～30个固定碱基，3～8个全简并的碱基N和3～7个固定碱基，其中所述N为：A或G或C或T。半随机引物的序列如序列表中SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。包含该引物的PCR反应程序优选地包括：（1）95℃变性5分钟；（2）94℃变性30秒；（3）56℃退火30秒；（4）72℃延伸2分钟，步骤（2）～（3）重复30个循环；（5）72℃，延伸300秒；（6）产物于4℃保存。该半随机引物通用性强，特别适合未知基因序列的扩增，该PCR反应程序简单，扩增核酸目的序列特异性较强。
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公开(公告)号：CN102732517A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210251634.5
申请日：2012-07-19
申请人： 光明乳业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种用于PCR步移技术的半随机引物、试剂盒及运用所述试剂盒进行PCR步移的方法。所述半随机引物的序列如序列表中SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示。所述试剂盒包括所述半随机引物。所述方法同普通二条引物的PCR相类似，最多只需二轮PCR即可获得目标序列，操作简单、快速、高效。该方法通过提高了整个PCR循环过程中的退火温度，增加了扩增特异性，且对实验材料没有限制，微生物、动物和植物样品均可使用。本方法用于实验中可以简化操作，缩短实验时间，提高实验效率，降低实验成本，具有十分广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102453767A
公开(公告)日：2012-05-16
申请号：CN201110439153.2
申请日：2011-12-23
申请人： 光明乳业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种快速定量检测植物乳杆菌ST-III的方法及其试剂盒。包括以下步骤：1)提取待检样品的总RNA；2)将步骤1)提取的总RNA反转录成cDNA；3)采用特异性扩增植物乳杆菌ST-III的引物对，以步骤2)所得cDNA为模板，进行荧光定量PCR扩增检测；4)通过比较待检样品和定量外标准品的循环阈值而对待检样品中的实际拷贝数进行定量。本发明可以快速的检测样品中的植物乳杆菌ST-III数量，快速、特异性强、灵敏度高，检测限达到2.85x103CFU/mL。
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公开(公告)号：CN104531692B
公开(公告)日：2017-10-24
申请号：CN201410837326.X
申请日：2014-12-24
申请人： 光明乳业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种检测干酪乳杆菌菌株(Lactobacillus casei)的方法及其试剂盒和引物对。该引物对的核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID NO.1所示和如序列表中SEQ ID NO.2所示。所述的方法包括以下步骤：(1)提取待检样品的基因组DNA作为模板，以核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物对作为引物，进行PCR扩增；(2)检测步骤(1)PCR扩增产物中是否在569bp位置存在单一扩增产物。所述的检测方法检测时间短；检测成本低；检测结果可靠，可以应用于乳制品中干酪乳杆菌的检测。
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