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公开(公告)号：CN103205452A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201310056858.5
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种合成的重组鸭β-防御素-2蛋白的重组酵母阳性转化子的生产方法，其特征在于：（1）重组质粒的制备和线性化；（2）毕赤酵母电转化感受态细胞的制备；（3）毕赤酵母的电击转化：重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN102433342B
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201110400781.X
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种合成的鸭β-防御素-2基因、含该基因的重组质粒与重组酵母转化子及重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法，其中重组鸭β-防御素-2基因参照GenBank中注册的鸭AvBD2基因cDNA基因序列，同时根据酵母密码子偏好性对鸭AvBD2基因成熟肽段核苷酸序列进行改造，然后利用基因合成方法合成，含该基因的重组质粒重组质粒的构建过程依次是：（1）鸭β-防御素-2基因上游引物、下游引物的设置过程；（2）鸭β-防御素-2基因片段的PCR扩增过程；（3）重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建；重组鸭β-防御素-2蛋白的重组酵母阳性转化子的生产方法包括（1）重组质粒的制备和线性化、（2）毕赤酵母电转化感受态细胞的制备、（3）毕赤酵母的电击转化；重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法包括（1）阳性酵母转化子的诱导表达。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN102433342A
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN201110400781.X
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种合成的鸭β-防御素-2基因、含该基因的重组质粒与重组酵母转化子及重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法，其中重组鸭β-防御素-2基因参照GenBank中注册的鸭AvBD2基因cDNA基因序列，同时根据酵母密码子偏好性对鸭AvBD2基因成熟肽段核苷酸序列进行改造，然后利用基因合成方法合成，含该基因的重组质粒重组质粒的构建过程依次是：（1）鸭β-防御素-2基因上游引物、下游引物的设置过程；（2）鸭β-防御素-2基因片段的PCR扩增过程；（3）重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建；重组鸭β-防御素-2蛋白的重组酵母阳性转化子的生产方法包括（1）重组质粒的制备和线性化、（2）毕赤酵母电转化感受态细胞的制备、（3）毕赤酵母的电击转化；重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法包括（1）阳性酵母转化子的诱导表达。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN108642108A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810478952.2
申请日：2018-05-16
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 本发明公开了一种高效的重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法，其选用含有1％酵母浸出物、2％蛋白胨、1％甘油的YPG发酵培养基和选用含有1％酵母浸出物、2％蛋白胨、1％甲醇的YPM诱导表达培养基分别进行摇瓶培养，装载量为10％，接种量为10％，生长期控温30℃，诱导表达期控温25℃，24h甲醇浓度为1％，培养周期为96h。本发明针对现有技术中重组鸭β-防御素-2蛋白的摇瓶培养进行培养条件优化，具体地优化了培养基成分、温度、装液量和甲醇浓度几个培养条件，从而有效获得更多的重组鸭β-防御素-2蛋白，大大提高了摇瓶培养生产重组鸭β-防御素-2蛋白的效率，进而为日后大规模发酵生产打下基础。
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公开(公告)号：CN103205453B
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201310056861.7
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种含有合成的重组鸭β-防御素-2基因的重组质粒，其特征在于，含有重组鸭β-防御素-2基因的重组质粒的构建过程依次是：（1）鸭β-防御素-2基因上游引物、下游引物的设置过程：（2）鸭β-防御素-2基因片段的PCR扩增过程：重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN103205477B
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201310056859.X
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法，其特征在于，含鸭β-防御素-2的酵母重组转化子体外诱导表达过程：（1）阳性酵母转化子的诱导表达：结果显示诱导培养后的菌体蛋白与未诱导的对照组相比，有一条大小为4.32kD非常明显的蛋白表达条带，经超高效液相色谱-电喷雾串联质谱鉴定，与目的蛋白氨基酸序列相吻合，表明目的基因已经得到表达即重组鸭β-防御素-2蛋白已经生产出来。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN102433353A
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN201110400782.4
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种鸭AvBD2基因真核表达质粒及由该质粒制成的分子佐剂和疫苗其特征在于鸭AvBD2基因真核表达质粒由pcDNA3.1(+)真核表达载体、连接在pcDNA3.1(+)真核表达载体上的鸭AvBD2基因片段构成，由该质粒制成的分子佐剂是将鸭AvBD2基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-AvBD2用PBS缓冲液稀释成1mg/ml即可，疫苗是将鸭AvBD2基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-AvBD2用PBS缓冲液稀释成1mg/ml，然后与禽DNA疫苗混合即可。本发明与已有技术相比，具有鸭β-防御素-2（AvBD2）所特有的免疫增强作用的、适合在禽类DNA疫苗中使用的优点。
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公开(公告)号：CN103205452B
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201310056858.5
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种合成的重组鸭β-防御素-2蛋白的重组酵母阳性转化子的生产方法，其特征在于，（1）重组质粒的制备和线性化：（2）毕赤酵母电转化感受态细胞的制备：（3）毕赤酵母的电击转化：重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN103205477A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201310056859.X
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种重组鸭β-防御素-2蛋白的生产方法，其特征在于，含鸭β-防御素-2的酵母重组转化子体外诱导表达过程：（1）阳性酵母转化子的诱导表达：结果显示诱导培养后的菌体蛋白与未诱导的对照组相比，有一条大小为4.32kD非常明显的蛋白表达条带，经超高效液相色谱-电喷雾串联质谱鉴定，与目的蛋白氨基酸序列相吻合，表明目的基因已经得到表达即重组鸭β-防御素-2蛋白已经生产出来。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。
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公开(公告)号：CN103205453A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201310056861.7
申请日：2011-12-06
申请人： 佛山科学技术学院
摘要： 一种含有合成的重组鸭β-防御素-2基因的重组质粒，其特征在于，含有重组鸭β-防御素-2基因的重组质粒的构建过程依次是：（1）鸭β-防御素-2基因上游引物、下游引物的设置过程：（2）鸭β-防御素-2基因片段的PCR扩增过程：重组质粒pPICZα-A-AvBD2的构建。本发明与已有技术相比，具有抗菌促生长活性，适合于在畜牧生产中进行应用，而且生产成本低、生产效率高的优点。
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